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药学-中药鉴定学(皮类和茎木类药材)皮类药材DNA鉴别试题及答案

药学-中药鉴定学(皮类和茎木类药材)专题文档

（一）考查目的与理论基础

1.考查目的

本部分旨在系统阐述皮类和茎木类药材的鉴定方法，重点突出DNA鉴别技术的应用。通过学习，药学院本科/研究生及药师应掌握：

-皮类药材的性状、显微、理化及现代鉴别特征；

-茎木类药材的鉴定要点与DNA指纹图谱分析技术；

-常见真伪品与混淆品的鉴别方法；

-DNA鉴别技术在药材真伪鉴定中的应用原理。

2.理论基础

皮类药材主要来源于植物茎干或根的木质部与韧皮部，如厚朴、黄柏等；茎木类药材则来源于植物茎干，如杜仲、降香等。其鉴定依据包括：

-性状特征：如厚度、颜色、气味、纹理等；

-显微特征：如细胞构造、淀粉粒、草酸钙结晶等；

-理化鉴别：如荧光反应、化学试剂检测等；

-DNA鉴别：基于核糖体DNA（rDNA）、线粒体DNA（mtDNA）或叶绿体DNA（cpDNA）的序列分析，构建指纹图谱。

DNA鉴别技术通过PCR扩增目标片段（如ITS、ITS+5.8S、ITS+28S、matK、trnL-F等），结合序列比对或限制性片段长度多态性（RFLP）分析，实现物种特异性鉴定，是解决传统方法难以区分的近缘种或掺伪问题的关键手段。

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（二）核心知识点总结

1.皮类药材鉴定要点

|药材名称|植物来源|性状特征|显微特征|DNA鉴别靶标|

|---------|---------|---------|---------|---------|

|厚朴|樟科厚朴属|厚片，黄棕色，油点明显|石细胞群、纤维、淀粉粒|ITS、trnL-F|

|黄柏|芸香科黄柏属|板状，黄绿色，具特殊气味|木栓层、石细胞、草酸钙砂晶|ITS、matK|

|桂皮|樟科肉桂属|薄片，红棕色，有樟脑香气|薄壁细胞、纤维、油细胞|ITS、trnL-F|

|杜仲|杜仲科杜仲属|细长条状，暗紫色，有弹性|木质部筛管群、石细胞|ITS、trnL-F|

2.茎木类药材鉴定要点

|药材名称|植物来源|性状特征|显微特征|DNA鉴别靶标|

|---------|---------|---------|---------|---------|

|杜仲|杜仲科杜仲属|细长条状，暗紫色，有弹性|木质部射线、导管|ITS、trnL-F|

|降香|豆科黄檀属|质坚硬，深褐色，香气浓郁|薄壁细胞、导管、淀粉粒|ITS、matK|

|钩藤|茜草科钩藤属|细长藤状，黄绿色|韧皮部纤维、淀粉粒|ITS、trnL-F|

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（三）具体鉴别方法

1.性状鉴别

-厚朴：厚片，外表面灰棕色，内表面紫棕色，油点明显，断面有油性光泽。

-黄柏：板状，黄绿色，香气浓烈，断面纤维性。

-杜仲：卷曲状，暗紫色，弹性强，断面有银白色胶丝。

2.显微鉴别

-厚朴：石细胞群单个或数个成群，内含棕黄色物质；纤维成束。

-黄柏：石细胞呈波浪形，草酸钙砂晶散在。

-杜仲：木质部筛管群明显，石细胞散在。

3.理化鉴别

-荧光反应：黄柏内含物在紫外灯下呈亮黄色。

-化学试剂：厚朴含厚朴酚，与三氯化铁反应呈深绿色。

4.DNA鉴别技术

（1）PCR扩增与测序

-ITS区：扩增rDNA内部转录spacer（ITS），适用于区分近缘种。

-matK区：叶绿体编码基因，适用于木本植物。

-trnL-F区：叶绿体基因间隔区，分辨率高。

（2）限制性片段长度多态性（RFLP）

-通过限制性内切酶识别特异位点，分析片段长度差异。

（3）DNA条形码

-结合多个基因片段（ITS+matK+trnL-F），构建物种特异性条形码。

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（四）常见真伪品与混淆品对比表

|药材名称|真品特征|伪品特征|DNA鉴别差异|

|---------|---------|---------|---------|

|厚朴|石细胞群明显|伪品为伪厚朴（非厚朴属）|ITS序列差异|

|黄柏|草酸钙砂晶|伪品为关黄柏（非黄柏属）|ITS+matK差异|

|杜仲|银白色胶丝|伪品为野杜仲（非杜仲属）|trnL-F序列差异|

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（五）试题部分

1.单选题

1.下列哪项是厚朴DNA鉴别的常用靶标？

A.ITS区

B.5.8SrRNA

C.28SrRNA

D.18SrRNA

答案：A

2.黄柏的理化鉴别特征是？

A.紫外灯下呈亮黄色

B.与三氯化铁反应呈红色

C.油点明显

D.具有银白色胶丝

答案：A

3.杜仲的DNA条形码组合通常包括哪些基因？

A.ITS+matK

B.trnL-F+5.8S

C.ITS+trnL-F

D.28S+18S

答案：C

2.多选题

1.以下哪些属于皮类药材的显微特征？

A.石细胞群

B.草酸钙结晶

C.油细胞

D.筛管群

答案：A、B

2.DNA鉴别技术中常用的靶标包括？

A.ITS

B.ma