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生物医药原代细胞培养员岗位考试试卷及答案

一、单项选择题（每题2分，共20分）

1.原代细胞培养常用的消化液是（）

A.胰蛋白酶B.胃蛋白酶C.脂肪酶D.淀粉酶

2.细胞培养的适宜温度是（）

A.25℃B.37℃C.40℃D.42℃

3.以下哪种器皿不能用于原代细胞培养（）

A.培养瓶B.培养皿C.离心管D.锥形瓶

4.原代细胞取材常用的动物是（）

A.兔子B.狗C.小鼠D.猪

5.细胞培养时，常用的血清是（）

A.小牛血清B.马血清C.羊血清D.人血清

6.进行细胞计数时，常用的工具是（）

A.显微镜B.流式细胞仪C.血细胞计数板D.酶标仪

7.原代细胞培养过程中，首次换液时间一般是（）

A.12小时B.24小时C.48小时D.72小时

8.细胞培养所用的PBS缓冲液的主要作用是（）

A.提供营养B.调节pH值C.杀菌D.消化细胞

9.原代细胞培养时，CO?培养箱中CO?浓度一般为（）

A.1%B.5%C.10%D.20%

10.以下哪种物质不是细胞培养的添加剂（）

A.抗生素B.维生素C.葡萄糖D.氢氧化钠

二、多项选择题（每题2分，共20分）

1.原代细胞培养的取材来源有（）

A.组织器官B.血液C.羊水D.尿液

2.细胞培养需要的基本条件包括（）

A.合适的培养基B.适宜的温度C.无菌环境D.充足的气体

3.常用的细胞消化方法有（）

A.胰蛋白酶消化法B.胶原酶消化法C.机械分散法D.酶解法

4.细胞培养过程中可能出现的污染有（）

A.细菌污染B.真菌污染C.支原体污染D.病毒污染

5.以下属于细胞培养器皿的有（）

A.培养瓶B.培养皿C.移液管D.滴管

6.原代细胞培养的优点有（）

A.更接近体内状态B.可长期传代C.便于研究细胞特性D.操作简单

7.细胞计数的方法有（）

A.血细胞计数板计数B.台盼蓝染色计数C.流式细胞仪计数D.比色法计数

8.细胞培养时，对水的要求有（）

A.无菌B.无热源C.高纯度D.蒸馏水即可

9.原代细胞培养中，常用的抗生素有（）

A.青霉素B.链霉素C.庆大霉素D.红霉素

10.影响原代细胞培养成功的因素有（）

A.取材部位B.消化时间C.培养条件D.操作人员技术

三、判断题（每题2分，共20分）

1.原代细胞培养不需要无菌操作。（）

2.细胞培养过程中，血清可以提供细胞生长所需的多种营养物质。（）

3.胰蛋白酶消化细胞时间越长越好。（）

4.细胞培养瓶可以不清洗直接使用。（）

5.原代细胞培养时，不需要检测细胞的活性。（）

6.支原体污染不会影响细胞的生长。（）

7.二氧化碳培养箱的作用只是提供二氧化碳。（）

8.细胞培养的培养基可以随意配制。（）

9.原代细胞培养只能从动物组织中取材。（）

10.细胞计数时，只需要计数视野内的全部细胞。（）

四、简答题（每题5分，共20分）

1.简述原代细胞培养的基本步骤。

答：取材（选取合适组织）、组织处理（清洗、剪碎等）、消化（用胰蛋白酶等消化液消化）、接种（将细胞悬液接种到培养器皿）、培养（置于适宜条件下培养）。

2.如何判断细胞培养过程中是否有污染？

答：观察培养液颜色变化（如变黄、浑浊），显微镜下可见细菌、真菌形态，细胞生长异常（生长缓慢、形态改变、死亡等），气味异常（有臭味）等可判断可能有污染。

3.简述细胞培养对培养基的要求。

答：含有细胞生长所需营养物质（氨基酸、维生素、糖类等），合适的酸碱度（pH一般7.2-7.4），渗透压适宜，无菌、无热源，能维持细胞正常生理功能。

4.细胞培养时为什么要控制CO?浓度？

答：CO?可参与维持培养液的酸碱平衡，细胞代谢会产生酸性物质，CO?与碳酸氢盐缓冲系统共同调节，使培养液pH稳定在适宜范围，利于细胞生长。

五、讨论题（每题5分，共20分）

1.讨论原代细胞培养在生物医药领域的应用前景。

答：原代细胞培养能提供更接近体内生理状态的细胞模型，在药物研发中可用于药物筛选、药效评估；在细胞治疗领域，为细胞制备提供起始材料；还可用于研究疾病发病机制等，随着技术发展，应用前景广阔，有望推动生物医药创新发展。

2.当细胞培养过程中出现污染，应采取哪些措施？

答：首先隔离污染细胞，防止扩散。轻度污染可尝试更换培养液、添加高浓度抗生素挽救；严重污染则需丢弃培养物，对培养器皿彻底清洗消毒，重新接种培养，同时排查污染来源，如环境、试剂等并加以改进。

3.比较原代细胞培养与细胞系培养的优缺点。

答：原代细胞优点是更接近体内状态，利于研究细胞特性；缺点是不易长期传代，操作复杂，个体差异大。细胞系优点是可长期传代，易培养，实验重复性好；缺点是与体内状态有差异，可能发生遗传改变。

4.如何提高原代细胞培养的成功率？

答：选取合适取材部位和时机，严格无菌操作，控制好消化时间和条件，选用优质培养基和血清，优化培养条件（温度、气