蛋白质的两性电离与等电点29课件.pptxVIP

蛋白质的两性电离与等电点

目录CONTENTS一、蛋白质的两性电离二、蛋白质两性电离的生理功能三、蛋白质的等电点四、蛋白质等电点的应用

三、蛋白质的等电点

三、蛋白质的等电点蛋白质在溶液中的带电状态主要取决于溶液的pH值，当蛋白质所带的正负电荷相等时，净电荷为零，此时溶液的pH值称为蛋白质的等电点，用pI表示。不同蛋白质具有特定的等电点。在等电点时，由于不存在电荷排斥现象，蛋白质颗粒容易聚集沉淀，此时蛋白质的溶解度、黏度、渗透压、膨胀性及导电能力都最小。pH＜pI???????????????pH=pI??????????????pH＞pI

三、蛋白质的等电点若蛋白质溶液的pH低于pI，则蛋白质主要以阳离子形式存在，在电场中向负极泳动；若蛋白质溶液pH高于pI，则蛋白质主要以阴离子形式存在，在电场中向正电方向泳动，这叫做电泳现象。蛋白质含有许多可变两性形式的离子基团，某些蛋白质的一部分可解离基团埋藏在分子内部或参与氢键形成而不能解离，无法利用Henderson-Hasselbalch方程式计算其pI值，蛋白质的pI值是通过实验测定的，即检测电场内蛋白质不发生迁移时的pH值。

四、蛋白质等电点的应用

混合蛋白质溶液中蛋白质电荷和数量不同，在电场中泳动速度不同，常利用这种性质来分离提纯蛋白质（详见蛋白质的分离纯化部分）。体内各种蛋白质的等电点不同，大多数偏弱酸性，pI值为5左右。四、蛋白质等电点的应用

在临床中，通常在pH=8.6时，即高于多数蛋白质的pI值时电泳分离血浆蛋白，在该pH条件下蛋白质都带负电荷，向正极泳动。不同的血浆蛋白迁移的顺序和量将在电泳中呈现出不同条带，特定蛋白主要聚集在某一条带，它们相对量的变化可用于疾病诊断，如肾病综合征时血浆内低分子量蛋白质选择性丢失、感染发炎的快速免疫应答反应期α2迁移带的结合珠蛋白升高，免疫延迟反应中免疫球蛋白增加，τ-珠蛋白峰值升高。四、蛋白质等电点的应用

四、蛋白质等电点的应用在电场内建立pH梯度，电泳时，带电蛋白质在pH梯度内迁移到达与其pI相等的区域静止。即使只有0.0025的pI差异，任可被分离开。此法叫做等电聚焦（isoelectricfocusing）。血红蛋白等电聚焦是一种用于检测血红蛋白类型及比例的实验室技术，临床主要用于筛查和诊断血红蛋白病（如地中海贫血）及异常血红蛋白变异体（如HbS、HbC）

汇报完毕谢谢大家