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实验种子生活力测定一、实验目的通过实验,掌握主要作物种子生活力测定方法、基本操作和结果计算。氯化三苯基四氮唑(TTC)法红墨水(酸性大红G)染色法二、实验原理1、氯化三苯基四氮唑(TTC)法凡有生活力的种子胚部在呼吸作用过程中都有氧化还原反应,而无生活力的种胚则无此反应。当TTC溶液渗入种胚的活细胞内,并作为氢受体被脱氢辅酶(NADH2或NADPH2)还原时,可产生红色的三苯基甲腙(TTF),胚便染成红色。当种胚生活力下降时,呼吸作用明显减弱,脱氢酶的活性亦大大下降,胚的颜色变化不明显,故可由染色的程度推知种子的生活力强弱。2、红墨水(酸性大红G)染色法有生活力的种子其胚细胞的原生质具有半透性,有选择吸收外界物质能力,某些染料如红墨水中的酸性大红G不能进入细胞内,胚部不染色。而丧失活力的种子其胚部细胞原生质膜丧失了选择吸收的能力,染料进入细胞内使胚部染色,所以可根据种子胚部是否染色来判断种子的生活力。活种子死种子三、试材与设备【实验材料】玉米种子【仪器与用具】培养皿、镊子、单面刀片、白瓷盘、烧杯、棕色试剂瓶【试剂】0.3%TTC溶液。5%红墨水溶液:取市售红墨水稀释20倍(1份红墨水加19份自来水)作为染色剂。四、步骤1.浸种:将玉米种子用温水浸泡2~6h,使种子充分吸胀。2.取样:随机取经过浸种吸胀后的种子50粒,放置于瓷盘中。3.切分种子:用单面刀片沿胚部中线纵切成两半,分别放入两个培养皿中。4.种子染色:1个培养皿中加入5%红墨水没过种子,染色10分钟。另一个加入TTC溶液,放入30~35℃的恒温箱内保温30min。6.生活力观察:立刻观察种胚和胚乳着色情况,判断种子生活力。(TTC反应结束,从黑暗下取出后立即观察,因光下久放TTC本身会变色)?不同方法测定种子生活力统计表方法供试粒数有生活力种子粒数无生活力种子粒数有生活力种子占供试粒数的%TTC50红墨水50五、作业:填写下表**净度测定有两个目的:一、为种子清选和质量评价提供依据;二、分离出的净种子为其它项目的检验提供样品。*钟鼎式分样器、横格式分样器、电动离心式分样器。手工分样时用分样板毛刷用于麸壳等轻质杂质**净度测定有两个目的:一、为种子清选和质量评价提供依据;二、分离出的净种子为其它项目的检验提供样品。*钟鼎式分样器、横格式分样器、电动离心式分样器。手工分样时用分样板毛刷用于麸壳等轻质杂质
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