2026版湖南版选考总复习生物学53B版专题22　基因工程 训练册PPT.pptxVIP

第5部分生物技术与工程;目录;;1.(2025湖南,2,2分)用替代的实验材料或者试剂开展下列实验,不能达成实验目的的是

();2.(2024湖南,5,2分)某同学将质粒DNA进行限制酶酶切时,发现DNA完全没有被酶切,分

析可能的原因并提出解决方法。下列叙述错误的是?()

A.限制酶失活,更换新的限制酶

B.酶切条件不合适,调整反应条件如温度和酶的用量等

C.质粒DNA突变导致酶识别位点缺失,更换正常质粒DNA

D.酶切位点被甲基化修饰,换用对DNA甲基化不敏感的限制酶;

解析????限制酶失活会使DNA完全不被酶切,此时应更换新的限制酶,A正确;酶切条件不

合适通常会使切割效果下降,此时应有部分DNA被酶切,即使酶切条件导致限制酶失

活,而使DNA完全没有被酶切,也不能通过改变“酶的用量”来调整反应,B错误;质粒

DNA突变导致限制酶识别位点缺失,会造成限制酶无法进行切割,因此应更换为正常质

粒DNA,C正确;质粒DNA上酶切位点被甲基化修饰,会导致对DNA甲基化敏感的限制

酶无法进行酶切,此时应换用对DNA甲基化不敏感的限制酶,D正确。;3.(不定项)(2024湖南,15,4分)最早的双脱氧测序法是在PCR反应体系中,分别再加入一

种少量的双脱氧核苷三磷酸(ddATP、ddCTP、ddGTP或ddTTP),子链延伸时,双脱氧核

苷三磷酸也遵循碱基互补配对原则,以加入ddATP的体系为例:若配对的为ddATP,延伸

终止;若配对的为脱氧腺苷三磷酸(dATP),继续延伸;PCR产物变性后电泳检测。通过该

方法测序某疾病患者及对照个体的一段序列,结果如图所示。下列叙述正确的是?()

A.上述PCR反应体系中只加入一种引物

B.电泳时产物的片段越小,迁移速率越慢

C.5-CTACCCGTGAT-3为对照个体的一段序列

D.患者该段序列中某位点的碱基C突变为G;

解析利用双脱氧测序法时,PCR反应体系中加入的模板是待测的单链DNA,故只需加

入一种引物,A正确;其他条件一致时,电泳时,产物的片段越大,迁移速率越慢,B错误;

DNA子链延伸方向为5→3,图示电泳方向为上→下,则相应DNA片段长度为长→短,分

析电泳结果,对照个体电泳结果最短的条带为ddCTP泳道组的条带,则说明DNA子链片

段5端第一个碱基为C,??推知对照个体的DNA子链序列为5-CTACCCGTGAT-3,则模

板DNA序列为5-ATCACGGGTAG-3,同理患者的子链序列为5-CTACCTGTGAT-3,则

模板DNA序列为5-ATCACAGGTAG-3,对比可知,患者该段序列中某位点的碱基G突

变为A,C正确,D错误。;4.(2025湖南,21,13分)非洲猪瘟病毒是一种双链DNA病毒,可引起急性猪传染病。基因

A编码该病毒的主要结构蛋白A,其在病毒侵入宿主细胞和诱导机体免疫应答过程中发

挥重要作用。回答下列问题:

(1)制备特定抗原

①获取基因A,构建重组质粒(该质粒的部分结构如图所示)。重组质粒的必备元件包括

目的基因、限制酶切割位点、标记基因、启动子和__________________等;为确定基因A

已连接到质粒中且插入方向正确,应选用图中的一对引物_________对待测质粒进行PCR

扩增,预期扩增产物的片段大小为_______bp。;?

②将DNA测序正确的重组质粒转入大肠杆菌构建重组菌。培养重组菌,诱导蛋白A合

成。收集重组菌发酵液进行离心,发现上清液中无蛋白A,可能的原因是______________

___________________________________________________________________________

________________________________________(答出两点即可)。;(2)制备抗蛋白A单克隆抗体

用蛋白A对小鼠进行免疫后,将免疫小鼠B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,诱导融合

的常用方法有___________________________________(答出一种即可)。选择培养时,对

杂交瘤细胞进行克隆化培养和__________,多次筛选获得足够数量的能分泌所需抗体的

细胞。体外培养或利用小鼠大量生产的抗蛋白A单克隆抗体,可用于非洲猪瘟的早期

诊断。;

解析????(1)①PCR时选用的两种引物应该方向相反,分析题图,P3是唯一一个与P1和P2方

向相反的引物,故必选P3;PCR的目的是确定基因A已连接到质粒中且插入方向正确,P3

和P2分别与基因A两端互补配对,若选该对引物进行扩增,无论基因A插入质粒方向是

否正确都可以扩增出片段(基因A),不符合要求;P1与质粒一段序列