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2025年生物技术师考试备考题库及答案解析

单位所属部门：________姓名：________考场号：________考生号：________

一、选择题

1.生物技术师在实验室操作中，处理有毒有害废弃物时，以下做法错误的是（）

A.将废液分类后倒入指定的废液桶中

B.将所有固体废弃物混合后直接丢弃

C.使用专用容器收集易燃易爆废弃物

D.对废弃物进行无害化处理后再处置

答案：B

解析：有毒有害废弃物必须分类处理，不能随意混合。固体废弃物应使用专用容器收集，并根据其性质进行无害化处理，如灭菌、中和等，然后再按照规定进行处置。直接混合丢弃会引发环境污染和安全风险。

2.在进行基因克隆实验时，以下哪一步操作是多余的（）

A.提取目的基因

B.构建表达载体

C.将表达载体转化到宿主细胞中

D.直接在培养基中培养宿主细胞

答案：D

解析：基因克隆实验流程包括提取目的基因、构建表达载体、将载体转化到宿主细胞中，并在选择性的培养基中培养，以筛选成功转化的细胞。直接在普通培养基中培养无法筛选出成功克隆的细胞。

3.细胞培养过程中，以下哪种现象不属于正常细胞生长表现（）

A.细胞贴壁生长

B.细胞形态保持稳定

C.细胞周期有序进行

D.细胞出现异常分裂

答案：D

解析：正常细胞培养时，细胞会贴壁生长，保持原有形态，并按细胞周期有序分裂。细胞出现异常分裂可能是由于培养条件不当或细胞受到损伤等原因，不属于正常生长表现。

4.在进行PCR扩增实验时，以下哪个环节对扩增效率影响最大（）

A.引物设计

B.DNA模板浓度

C.循环次数

D.退火温度

答案：A

解析：PCR扩增效率受多种因素影响，其中引物设计最为关键。引物特异性差、结合效率低或存在二聚体形成都会严重影响扩增效果。其他因素如模板浓度、循环次数和退火温度虽然也重要，但调整引物设计通常能更显著地提高扩增效率。

5.生物信息学分析中，用于比对两段DNA序列相似性的工具是（）

A.BLAST

B.ClustalW

C.Geneious

D.PyMOL

答案：A

解析：BLAST（基本局部对齐搜索工具）是用于在大型基因数据库中查找与查询序列相似性的工具，特别适用于DNA或蛋白质序列比对。ClustalW是多序列比对工具，Geneious是生物信息学软件平台，PyMOL是分子可视化软件。

6.在微生物发酵过程中，以下哪个参数不属于关键控制指标（）

A.温度

B.pH值

C.溶解氧

D.营养物浓度

答案：D

解析：微生物发酵过程中，温度、pH值和溶解氧是直接影响微生物生长和代谢的关键环境参数。营养物浓度虽然重要，但通常在发酵前通过优化培养基配方来控制，发酵过程中的主要监控指标是前三者。

7.细胞凋亡过程中，以下哪个分子是关键效应因子（）

A.Bcl2

B.Caspase3

C.NFκB

D.p53

答案：B

解析：Caspase3是细胞凋亡过程中的核心执行者，能够切割多种底物蛋白，引发细胞凋亡的级联反应。Bcl2是凋亡抑制因子，NFκB是转录因子，p53是肿瘤抑制蛋白，虽然它们也参与凋亡调控，但Caspase3是最关键的效应因子。

8.在动物细胞培养中，以下哪种方法最适合长期保存细胞系（）

A.传代培养

B.冷冻保存

C.甘油保存

D.离心沉淀

答案：B

解析：动物细胞长期保存最常用方法是冷冻保存，通过添加冷冻保护剂（如DMSO）后缓慢降温至80℃或液氮中，可以避免细胞在保存过程中因代谢活动或环境变化受损。传代培养适用于短期保存，甘油保存不适用于大多数细胞系，离心沉淀仅用于分离。

9.进行蛋白质纯化时，以下哪种层析技术主要基于蛋白质电荷性质分离（）

A.凝胶过滤层析

B.离子交换层析

C.凝胶层析

D.亲和层析

答案：B

解析：离子交换层析是根据蛋白质表面电荷与层析介质上带电基团的相互作用进行分离的技术。凝胶过滤层析（也称为分子排阻层析）基于分子大小分离，凝胶层析是历史术语，通常指离子交换或亲和层析，亲和层析基于特定生物分子间的特异性结合。

10.在基因编辑实验中，以下哪种技术不需要依赖同源重组（）

A.CRISPRCas9

B.ZFN

C.TALEN

D.PCR

答案：D

解析：CRISPRCas9、ZFN（锌指核酸酶）和TALEN（转录激活因子核酸酶）都依赖同源重组进行基因编辑。PCR（聚合酶链式反应）是分子克隆技术，用于DNA扩增，不涉及基因编辑。

11.在进行蛋白质印迹（WesternBlot）实验时，以下哪个步骤是最后的（）

A.将蛋白质转移到固相膜上

B.用特异性抗体孵育膜

C.用二抗孵育膜

D.用化学发光剂检测条带

答案：D

解析：蛋白质印迹实验的步骤通常包括样品电泳分离、转移