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第1篇
一、实验目的
本研究旨在探讨香菇多糖的提取、分离和纯化工艺,并通过实验验证不同方法的可行性和效果。通过优化实验条件,提高香菇多糖的纯度和收率,为香菇多糖的工业化生产提供技术支持。
二、实验材料与仪器
1.材料:
-香菇子实体
-乙醇
-盐酸
-氢氧化钠
-硫酸铵
-离子交换树脂
-DEAE纤维素
-硅胶
-水合氯醛
-氯化钠
-蔗糖
-硫酸铜
-氢氧化钠溶液
-碘液
-硫酸
-氯化钡
-氨水
-碘化钾
-碘液
-水合氯醛
-95%乙醇
-95%乙醇溶液
-0.1%碘液
-0.1%碘化钾溶液
-0.1%碘液溶液
-0.1%碘化钾溶液溶液
2.仪器:
-超滤设备
-超离心机
-高效液相色谱仪
-紫外分光光度计
-精密电子天平
-恒温水浴锅
-搅拌器
-烘箱
-离心管
-烧杯
-试管
-玻璃棒
-离心管架
-离心管盖
-滤纸
-滤膜
-离心瓶
-离心管
三、实验方法
1.香菇多糖提取:
-将香菇子实体洗净、烘干、粉碎,过60目筛。
-将粉碎后的香菇子实体加入适量的水,煮沸提取1小时。
-提取液过滤,收集滤液。
2.蛋白质去除:
-向滤液中加入硫酸铵,使蛋白质盐析沉淀。
-离心分离,收集沉淀。
3.离子交换树脂纯化:
-将沉淀用去离子水洗涤,除去杂质。
-将洗涤后的沉淀加入离子交换树脂柱中,用去离子水洗脱。
-收集洗脱液,进行检测。
4.DEAE纤维素纯化:
-将洗脱液加入DEAE纤维素柱中,用去离子水洗脱。
-收集洗脱液,进行检测。
5.硅胶柱层析:
-将DEAE纤维素纯化后的样品加入硅胶柱中,用95%乙醇洗脱。
-收集洗脱液,进行检测。
6.超滤纯化:
-将硅胶柱层析后的样品进行超滤,截留分子量范围为10-10000的成分。
-收集滤液,进行检测。
四、实验结果与分析
1.香菇多糖提取:
-通过煮沸提取法,从香菇子实体中提取出一定量的香菇多糖。
2.蛋白质去除:
-通过硫酸铵盐析法,成功去除香菇多糖中的蛋白质。
3.离子交换树脂纯化:
-通过离子交换树脂纯化,提高了香菇多糖的纯度。
4.DEAE纤维素纯化:
-通过DEAE纤维素纯化,进一步提高了香菇多糖的纯度。
5.硅胶柱层析:
-通过硅胶柱层析,进一步纯化了香菇多糖。
6.超滤纯化:
-通过超滤纯化,成功分离出分子量范围为10-10000的香菇多糖。
五、实验结论
本研究采用多种方法对香菇多糖进行了提取、分离和纯化,成功提高了香菇多糖的纯度和收率。实验结果表明,该方法具有较高的可行性和实用性,为香菇多糖的工业化生产提供了技术支持。
六、实验展望
在今后的研究中,可以从以下几个方面进行改进:
1.优化提取工艺,提高香菇多糖的提取率。
2.探索新型纯化方法,进一步提高香菇多糖的纯度和收率。
3.研究香菇多糖的药理活性,为香菇多糖的药用开发提供依据。
通过不断优化实验方法,提高香菇多糖的纯度和收率,为香菇多糖的工业化生产和药用开发奠定基础。
第2篇
一、实验目的
本实验旨在研究香菇多糖的提取、纯化工艺,通过采用超滤、醇沉等方法,提高香菇多糖的纯度和收率,为香菇多糖的进一步研究和应用提供实验依据。
二、实验材料与仪器
1.实验材料:
-香菇子实体
-无水乙醇
-95%乙醇
-75%乙醇
-蒸馏水
-酶结合Sevag法蛋白去除剂
-离心机
-超滤膜组件
-紫外可见分光光度计
-真空冷冻干燥机
2.实验仪器:
-电子天平
-恒温水浴锅
-高压蒸汽灭菌锅
-离心管
-烧杯
-试管
-研钵
-移液器
-玻璃棒
三、实验方法
1.香菇多糖提取:
-将香菇子实体洗净、烘干、粉碎,过筛后备用。
-称取一定量的香菇粉末,加入适量蒸馏水,加热提取,提取温度为90℃,提取时间为6小时。
-提取液用离心机离心分离,取上清液备用。
2.蛋白质去除:
-向提取液中加入酶结合Sevag法蛋白去除剂,充分混合,静置一段时间。
-离心分离,取上清液备用。
3.超滤纯化:
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