生物药品的分离纯化技术及其应用考核试卷及答案.docxVIP

生物药品的分离纯化技术及其应用考核试卷及答案

考试时间：______分钟总分：______分姓名：______

一、选择题（每小题2分，共20分。请将正确选项前的字母填在括号内）

1.在生物药品分离纯化中，下列哪种技术主要利用分子大小差异进行分离？（）

A.离子交换层析

B.凝胶过滤层析

C.亲和层析

D.膜分离技术

2.下列关于盐析的描述，错误的是？（）

A.是一种物理沉淀过程

B.利用高浓度盐离子与蛋白质水合作用减弱，导致蛋白质沉淀

C.是一种可逆的分离方法

D.通常用于初步纯化或去除杂蛋白

3.在亲和层析中，选择合适的配基是关键，下列哪项不是选择配基时需要考虑的因素？（）

A.配基与目标生物分子的结合特异性

B.配基的稳定性（在纯化条件下）

C.流动相的兼容性

D.目标生物分子的分子量大小

4.离子交换层析中，要使吸附在固定相上的带正电的蛋白质被洗脱下来，流动相缓冲液通常需要？（）

A.提高pH值至蛋白质等电点

B.降低pH值或提高盐浓度

C.保持与结合时相同的pH和盐浓度

D.使用非离子型去污剂

5.对于需要大规模生产生物药品的下游工艺，以下哪个因素通常最为关键？（）

A.纯化步骤的数量

B.纯化过程的自动化程度

C.工艺的稳定性和可重复性

D.单步纯化的理论回收率

6.在生物反应液中，蛋白质浓度通常很高，在进行第一步分离纯化前，常采用什么方法进行浓缩和除去部分盐类和小分子杂质？（）

A.凝胶过滤层析

B.亲和层析

C.超滤

D.离子交换层析

7.下列哪种分析方法常用于测定蛋白质纯度？（）

A.紫外分光光度法（UV-Vis）

B.碳水化合物分析仪

C.凝胶过滤层析（HPLC-GelFiltration）

D.毛细管区带电泳（PAGE）

8.生物活性测定在蛋白质分离纯化过程中的作用主要是？（）

A.确定蛋白质的分子量

B.判断蛋白质的纯度

C.追踪蛋白质在纯化过程中的损失情况

D.选择合适的层析介质

9.差速离心和密度梯度离心都是利用什么原理分离生物大分子？（）

A.电荷差异

B.分子大小和形状差异

C.生物活性差异

D.密度差异

10.在生物制药下游工艺中，无菌操作是哪个环节的严格要求？（）

A.原料准备

B.纯化过程

C.成品灌装

D.以上都是

二、填空题（每空1分，共15分。请将答案填在横线上）

1.生物药品分离纯化的基本要求通常包括__________、__________、__________和__________。

2.亲和层析的核心原理是利用配基与目标生物分子之间的高度__________和特异性__________。

3.凝胶过滤层析（也称排阻层析）的固定相通常是具有网状结构的__________，其分离依据是分子的大小。

4.当溶液的离子强度或pH发生变化，导致蛋白质所带净电荷为零时的pH值称为该蛋白质的__________。

5.膜分离技术中，根据孔径大小，微滤主要用于去除__________，超滤则可用于蛋白质的浓缩和脱盐。

6.在设计一个生物药品的分离纯化工艺路线时，应遵循__________、__________和__________的原则。

7.用于分离纯化的层析介质可以是固体（固定相）或液体（__________）。

三、名词解释（每小题3分，共12分。请给出简洁、准确的定义）

1.分离纯化

2.等电点

3.亲和层析

4.工艺放大

四、简答题（每小题5分，共20分。请简要回答下列问题）

1.简述离子交换层析的基本原理及其主要影响因素。

2.比较凝胶过滤层析和离子交换层析在分离机制和适用范围上的主要区别。

3.在生物药品的下游工艺中，为什么要进行浓缩和缓冲液交换？简述常用方法。

4.简述生物活性测定在蛋白质分离纯化过程中的作用。

五、论述题（10分。请结合具体实例或原理，深入阐述下列问题）

试述选择某种层析技术（如亲和层析）用于特定生物药品（如抗体）分离纯化的依据和考虑因素。

试卷答案

一、选择题

1.B

2.D

3.D

4.B

5.C

6.C

7.C

8.C

9.D

10.D

二、填空题

1.纯度、活性/效价、