抗原和抗体的制备.pptVIP

半抗原-载体连接方法1碳化二亚胺法：R-NH=CH-R’半抗原＋载体蛋白质搅拌1～2h室温24h透析除去未反应的半抗原人工免疫原半抗原载体连接方法1混合第30页，共61页，星期日，2025年，2月5日混合戊二醛法:半抗原-NH2载体蛋白-NH2半抗原-N=CH-(CH2)3-CH=NH-载体蛋白OHC-(CH2)3-CHO*戊二醛是常用的带有两个活性基团的双功能联接剂半抗原载体连接方法2第31页，共61页，星期日，2025年，2月5日半抗原-载体连接方法3氯甲酸异丁脂法：半抗原-COOH载体蛋白-NH2Cl-COO-CH2CH(CH3)2半抗原-COO-COO-CH2CH(CH3)2半抗原-CO-NH-载体蛋白半抗原载体连接方法3简便，用于类固醇抗原制备HO-CH2CH(CH3)2＋第32页，共61页，星期日，2025年，2月5日半抗原-载体连接方法4琥珀酸酐法：用于不含羧基衍生物半抗原制备半抗原-CH2OHCH2-COCH2-CO带羧基的半抗原琥珀酸衍生物半抗原-CH2-OOC-CH2-CH2-COOH吡啶再经氯甲酸异丁脂法或碳化二亚胺法制备载体半抗原半抗原载体连接方法4第33页，共61页，星期日，2025年，2月5日

佐剂

概念：能非特异地通过物理或化学方法与抗原结合从而增强其特异性免疫原性的物质。条件：①增加抗原的表面积；②改变抗原的活性基团构型；③佐剂与抗原混合能延长抗原在局部组织的存留时间；④可直接或间接激活免疫活性细胞；⑤无毒性或无副作用。第34页，共61页，星期日，2025年，2月5日（二）常用佐剂的种类和制备1.氢氧化铝佐剂：5%硫酸铝5%氢氧化钠氢氧化铝沉淀制成悬液即为佐剂强烈搅拌NS洗二次NS等体积抗原免疫接种常用佐剂的种类及制备第35页，共61页，星期日，2025年，2月5日2.明矾佐剂10%硫酸钾铝氢氧化钠校正pH值至6.5沉淀乳状悬液*明矾佐剂抗原常用于肌肉注射，皮下注射易引起肉芽种和脓肿。NS搅拌NS洗二次离心抗原备用防腐剂第36页，共61页，星期日，2025年，2月5日作用大于不完全佐剂局部形成肉芽种和溃疡不能用于人体弗氏完全佐剂3.弗氏佐剂(Freundadjuvant)液体石蜡完全乳化备用＋高压灭菌加热抗原弗氏不完全佐剂卡介苗羊毛脂鉴定一滴乳剂乳剂不散浮于液面水中混合第37页，共61页，星期日，2025年，2月5日①增强抗原对机体的免疫原性；②增强抗体的产生能力；③为制备出高效价的免疫血清；⑤在某种情况下，改变Ag免疫应答类型；⑥延长抗原在免疫动物的时间；⑧增强局部对变应原的超敏反情况。佐剂的作用第38页，共61页，星期日，2025年，2月5日人工抗原及基因工程抗原用化学合成法或基因重组法制备含有已知化学结构决定簇的抗原，称之为人工抗原。它可包括人工结合抗原、人工合成抗原和基因重组抗原。第39页，共61页，星期日，2025年，2月5日人工合成抗原用化学方法将活化氨基酸聚合，使之成为合成多肽。应用这种人工合成多肽可作为抗原。只由一种氨基酸形成的聚合体称为同聚多肽，如由左旋赖氨酸形成的同聚多肽。由二种或二种以上氨基酸形成的聚合多肽称为共聚多肽，如由酪氨酸、谷氨酸与多聚丙氨酸和赖氨酸组成的聚合成多肽。第40页，共61页，星期日，2025年，2月5日基因工程抗原将编码免疫原性氨基酸序列的基因克隆化并与适当载体DNA分子相结合，然后引入受体细胞中使之表达，即能获得免疫原性之融合蛋白，经纯化后即基因工程疫苗。基因工程乙型肝炎病毒疫苗和在牛痘苗表达系统中研制乙肝病毒的重组感染载体的多价疫苗。第41页，共61页，星期日，2025年，2月5日小结抗原的种类颗粒性抗原的制备可溶性抗原提取分离纯化方法抗原的鉴定半抗原免疫原的制备佐剂的作用第42页，共61页，星期日，2025年，2月5日第二节抗体的制备多克隆抗体的制备单克隆抗体技术基因工程抗体第43页，共61页，星期日，2025年，2月5日多克隆抗体的制备1.免疫动物选择2.免疫方法3.动物采血法