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演讲人:
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病理科肿瘤病理诊断流程指南
CATALOGUE
目录
01
标本接收与准备
02
标本处理与制片
03
染色与特殊处理
04
显微镜检查与评估
05
诊断分析与报告
06
质量控制与存档
01
标本接收与准备
接收标准与核对流程
接收标本时需核对送检单与标本容器标签信息是否一致,包括患者姓名、性别、标本类型及部位,确保无遗漏或错误。
完整性检查
检查标本固定液是否足量、组织是否完整,避免因运输不当导致的干涸、腐败或容器破损等情况影响后续检测。
对信息不全、标本不符或质量不达标的案例,需立即联系临床科室补充或重新采集,并记录在交接系统中。
标本状态评估
实行接收人员与复核人员双重确认机制,针对高风险标本(如术中快速病理)需额外标注并优先处理。
双人核对制度
01
02
04
03
异常情况处理
登记信息录入规范
系统自动校验必填项(如病理号、标本类型),并对特殊标本(如活检、切除组织)附加分类标签。
关键字段校验
隐私保护措施
历史数据关联
所有标本信息需通过病理信息系统(LIS)录入,确保患者ID、临床诊断、送检医生等字段完整,避免手工填写误差。
敏感信息(如患者联系方式)需加密存储,仅授权人员可调阅,符合医疗数据安全管理规范。
新录入标本需与患者既往病理记录关联,便于对比分析,系统自动提示重复送检或连续监测病例。
电子化录入要求
标本分类与标识方法
解剖学分类
按器官系统(如消化系统、呼吸系统)对标本进行初级分类,再细化至具体部位(如胃窦、肺叶),便于后续病理医师分工处理。
01
颜色编码标签
使用不同颜色标签区分标本类型(如绿色为常规活检、红色为冰冻切片),并在容器上标注“高危”“传染性”等警示标识。
条形码追踪
为每例标本生成唯一条形码,贯穿从接收、制片到归档的全流程,减少人工操作导致的混淆风险。
多标本分装规则
同一患者多部位标本需分装独立容器,并注明“A”“B”等序号,避免交叉污染或诊断混淆。
02
03
04
02
标本处理与制片
甲醛通过交联蛋白质分子稳定组织形态,需确保固定液浓度(通常为10%中性缓冲甲醛)与组织体积比例(1:10)符合标准,避免固定不足或过度。
固定技术与时间控制
甲醛固定原理
不同组织类型(如致密肿瘤与疏松脂肪)需差异化控制固定时长,确保充分渗透且避免细胞核细节模糊,常规组织建议固定6-48小时。
固定时间优化
针对微小活检或穿刺标本,需缩短固定时间至4-6小时,并采用专用固定盒防止组织丢失或变形。
特殊标本处理
梯度酒精脱水(70%-100%)需严格遵循时间梯度,二甲苯透明化阶段需彻底去除酒精残留,避免石蜡渗透不均导致组织脆裂。
脱水与透明化
熔融石蜡温度控制在56-58℃,浸渍时间依据组织厚度调整(通常2-4小时),确保完全填充组织间隙。
石蜡浸渍参数
使用预冷金属模具定向包埋,确保组织切面与切片方向一致,避免出现斜切或空泡现象。
包埋模具校准
包埋流程与标准操作
切片厚度标准
切片漂浮于40℃水浴中展开后贴附于防脱载玻片,避免使用过高水温导致组织膨胀或断裂。
防皱褶与展片
质量控制要点
每批次切片需通过HE染色预检,评估细胞核清晰度、染色质分布及组织结构完整性,不合格样本需重新制片。
常规诊断切片厚度为3-5微米,特殊染色(如弹力纤维)需调整至5-7微米,并采用一次性刀片减少刀痕伪影。
切片制作与厚度控制
03
染色与特殊处理
常规染色步骤指南
组织固定与脱水
采用中性缓冲福尔马林固定组织样本,确保结构完整性,随后通过梯度酒精脱水以去除水分,为后续浸蜡步骤做准备。
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03
01
苏木精-伊红(HE)染色
切片经脱蜡后依次浸入苏木精染核、分化液返蓝、伊红染胞质,最后脱水透明封片,形成细胞核蓝色、胞质粉红的对比染色效果。
石蜡包埋与切片
将脱水后的组织浸入液态石蜡并冷却固化,使用切片机切取4-5微米厚度的连续切片,确保切片平整无褶皱。
质量控制与复检
每批次染色需设置阳性对照样本,由资深技师评估染色均匀性、核质对比度及背景清洁度,不合格者需重新处理。
特殊染色应用场景
网状纤维染色(如Gomori法)
用于区分低分化癌与肉瘤,网状纤维包绕肉瘤细胞团而癌巢内无纤维分布,辅助判断肿瘤组织起源。
鉴别分泌黏液的肿瘤(如胃肠道腺癌),阿尔新蓝染酸性黏液呈蓝色,PAS染中性黏液呈紫红色,明确黏液性质。
评估血管壁侵犯或肺气肿病变,弹力纤维呈黑色,有助于判断肿瘤侵袭深度及间质破坏程度。
确诊淀粉样变性,刚果红染色后在偏振光下呈现苹果绿色双折光,特异性标记淀粉样蛋白沉积。
黏液染色(如AB-PAS)
弹力纤维染色(如Verhoeff法)
淀粉样物染色(如刚果红)
根据抗体要求选择热修复(高压锅或微波EDTA缓冲液)或酶消化(如胰蛋白酶),解除甲醛固定导致的抗原交联,恢复表位活
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