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血液常规检查操作指南

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目录

CATALOGUE

02

检测项目与原理

03

仪器操作规范

04

结果审核与报告

05

质量控制要点

06

生物安全管理

01

标本采集与处理

01

标本采集与处理

PART

采血前准备

使用一次性真空采血针，以15-30度角进针，见回血后固定针头，连接采血管，避免过度抽拉或推压导致溶血或组织液混入。

穿刺技术

采血后处理

拔针后立即用无菌棉签按压穿刺点5-10分钟，避免弯曲手臂或揉搓，防止血肿形成，同时标注采血时间及操作者信息。

确认患者身份及检测项目，选择合适的静脉穿刺部位（通常为肘正中静脉或贵要静脉），消毒皮肤范围直径不小于5cm，待消毒液完全干燥后再行穿刺。

静脉采血标准流程

抗凝管选择与混匀要求

EDTA抗凝管适用性

适用于血常规检测，其紫色头盖管内含乙二胺四乙酸二钾（K2EDTA），能有效螯合钙离子，防止血液凝固，但需注意采血量与抗凝剂比例（通常为1:1.5-2mL）。

混匀操作规范

特殊检测需求

采血后立即轻柔颠倒混匀8-10次，避免剧烈摇晃导致红细胞破裂或血小板聚集，混匀不充分可能导致假性血小板减少或凝血异常。

若需进行血沉或凝血功能检测，需分别选择黑色头盖枸橼酸钠管或蓝色头盖肝素钠管，并严格遵循抗凝剂与血液比例要求。

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标本转运与保存条件

转运时效性

采血后标本应在2小时内送至实验室，若延迟需置于4℃冷藏保存，但不得超过24小时，避免细胞形态变化或代谢产物干扰检测结果。

避光与防震

溶血敏感项目（如乳酸脱氢酶）需避光转运，运输过程中避免剧烈震动，防止机械性溶血影响血红蛋白和钾离子检测准确性。

温度控制

避免标本暴露于极端温度（如高温或冷冻），EDTA抗凝血在室温（18-25℃）下可稳定6-8小时，但血小板计数需在采血后1小时内完成检测。

02

检测项目与原理

PART

电阻抗法原理

通过血细胞在电解液中通过微孔时产生的电阻变化计数，红细胞、白细胞及血小板因体积差异形成不同脉冲信号，实现分类计数。

血细胞计数检测原理

光学散射技术

结合激光流式细胞术，利用前向散射光（反映细胞大小）和侧向散射光（反映细胞内部复杂度）区分白细胞亚群（中性粒细胞、淋巴细胞等）。

荧光染色辅助分析

部分高端仪器采用核酸荧光染料标记细胞，增强未成熟细胞或异常细胞的识别灵敏度，如网织红细胞计数。

国际标准方法，血红蛋白与试剂反应生成稳定的氰化高铁血红蛋白，在540nm波长下比色测定，结果准确但需处理剧毒废液。

氰化高铁血红蛋白法（HiCN）

无毒替代方案，血红蛋白与SDS结合形成复合物，通过比色测定，适用于自动化仪器但需校准不同血细胞比容影响。

十二烷基硫酸钠血红蛋白法（SDS-Hb）

通过测定血红蛋白在多个波长的吸光度，校正脂血、高白细胞等干扰因素，提高复杂样本的检测准确性。

多波长分光光度法

血红蛋白测定方法

血涂片制备与染色标准

推片厚度控制

取2-3μL血液以30°角推片，形成头体尾三部分，确保红细胞单层分布且白细胞均匀分散，避免过厚或过薄影响镜检。

瑞氏-吉姆萨染色

甲醇固定后，按比例混合瑞氏染液（嗜酸性成分）和吉姆萨染液（嗜碱性成分），染色5-10分钟，使细胞核、颗粒及胞质差异显色。

染色质量控制

定期用已知标本验证染色效果，确保中性粒细胞颗粒清晰、红细胞呈粉红色、淋巴细胞核染色质结构分明，避免沉淀或过染干扰诊断。

03

仪器操作规范

PART

全自动血细胞分析仪校准

标准物质校准

使用国际认证的标准物质进行仪器校准，确保血红蛋白、红细胞计数、白细胞分类等参数的测量准确性，校准过程需严格按照厂家说明书操作。

01

环境条件控制

校准前需确认实验室温度、湿度符合仪器要求，避免环境波动影响校准结果，同时需确保电源电压稳定，防止仪器运行异常。

多点校准验证

采用高、中、低不同浓度水平的校准品进行多点校准，验证仪器线性范围，确保全量程检测结果的可靠性，并记录校准数据备查。

校准后性能验证

校准完成后需运行质控样本进行性能验证，确认各参数CV值（变异系数）在可接受范围内，否则需重新校准或联系工程师检修。

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03

04

质控品选择与保存

每日质控执行流程

选择与检测项目匹配的质控品，严格按说明书要求保存（如冷冻或冷藏），使用前充分复温混匀，避免反复冻融导致质控品变性。

每批次检测前需运行至少两个浓度水平的质控品，覆盖医学决定水平，质控数据需实时录入LIS系统，自动生成Levey-Jennings质控图。

质控品执行与记录

失控处理程序

出现质控失控时立即暂停检测，按重测质控-更换试剂/校准-检查仪器-联系工程师的流程逐步排查原因，填写失控报告并记录纠正措施。

质控数据周期性分析

每月汇总质控数据，计算月均值、标准差和CV%，评估检测系统稳定性，发现趋势性变化时需启动预防性维护程