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再生医学心肌干细胞培养研究员岗位考试试卷及答案

单项选择题（每题2分，共10题）

1.心肌干细胞培养常用的基础培养基是（）

A.DMEMB.RPMI1640C.F12D.MEM

2.以下哪种细胞因子对心肌干细胞增殖有促进作用（）

A.TNF-αB.TGF-βC.VEGFD.IFN-γ

3.心肌干细胞培养时，一般选用的血清是（）

A.小牛血清B.胎牛血清C.马血清D.羊血清

4.细胞培养箱的气体环境一般是（）

A.95%O?+5%CO?B.95%空气+5%CO?

C.100%O?D.90%空气+10%CO?

5.进行心肌干细胞传代时，常用的消化液是（）

A.胰蛋白酶B.胃蛋白酶C.木瓜蛋白酶D.胶原蛋白酶

6.心肌干细胞培养的适宜温度是（）

A.35℃B.37℃C.39℃D.40℃

7.以下哪种物质可用于检测心肌干细胞的活性（）

A.MTTB.台盼蓝C.结晶紫D.中性红

8.心肌干细胞冻存时，常用的冻存保护剂是（）

A.DMSOB.甘油C.乙醇D.丙二醇

9.培养心肌干细胞的器皿需要进行（）处理。

A.消毒B.灭菌C.清洁D.冲洗

10.从心脏组织获取心肌干细胞常用的方法是（）

A.酶消化法B.机械分离法C.密度梯度离心法D.流式细胞术分选法

答案：1.A2.C3.B4.B5.A6.B7.A8.A9.B10.A

多项选择题（每题2分，共10题）

1.心肌干细胞培养需要的基本条件有（）

A.合适的培养基B.适宜的温度C.气体环境

D.无菌操作E.充足的光照

2.影响心肌干细胞培养的因素包括（）

A.细胞来源B.培养基成分C.培养器皿材质

D.传代次数E.细胞接种密度

3.以下属于心肌干细胞鉴定方法的有（）

A.免疫荧光B.流式细胞术C.RT-PCR

D.WesternblotE.细胞形态学观察

4.心肌干细胞培养过程中可能出现的问题有（）

A.细胞污染B.细胞凋亡C.细胞分化

D.细胞增殖缓慢E.细胞贴壁不良

5.常用的细胞培养耗材有（）

A.培养瓶B.培养皿C.移液管

D.枪头E.冻存管

6.血清在心肌干细胞培养中的作用有（）

A.提供营养物质B.促进细胞贴壁C.调节细胞代谢

D.维持细胞渗透压E.防止细胞污染

7.细胞培养过程中，无菌操作的要点包括（）

A.实验前消毒操作台面B.佩戴无菌手套C.使用无菌器材

D.操作在酒精灯火焰附近E.定期更换工作服

8.心肌干细胞冻存和复苏的注意事项有（）

A.冻存时缓慢降温B.复苏时快速解冻C.冻存液比例合适

D.复苏后及时换液E.标记冻存管信息

9.用于心肌干细胞培养的添加剂有（）

A.生长因子B.抗生素C.维生素

D.氨基酸E.激素

10.心肌干细胞的特性包括（）

A.自我更新能力B.多向分化潜能C.低免疫原性

D.高增殖能力E.组织修复能力

答案：1.ABCD2.ABCDE3.ABCDE4.ABCDE5.ABCDE6.ABCD7.ABCD8.ABCDE9.ABCDE10.ABCE

判断题（每题2分，共10题）

1.心肌干细胞培养不需要二氧化碳培养箱。（）

2.消化心肌干细胞时，消化时间越长越好。（）

3.台盼蓝可以区分活细胞和死细胞。（）

4.冻存的心肌干细胞复苏后可直接用于实验。（）

5.血清在使用前需要进行灭活处理。（）

6.细胞培养过程中，可随意打开培养箱门。（）

7.免疫荧光可用于心肌干细胞表面标志物的检测。（）

8.培养基中添加抗生素可以完全防止细胞污染。（）

9.心肌干细胞培养的传代比例固定不变。（）

10.原代培养的心肌干细胞活性高于传代培养的细胞。（）

答案：1.×2.×3.√4.×5.√6.×7.√8.×9.×10.√

简答题（每题5分，共4题）

1.简述心肌干细胞培养时选择胎牛血清的原因。

胎牛血清富含多种生长因子、激素和营养物质，能为心肌干细胞提供良好的营养环境，促进细胞的贴壁、增殖和生长，且其未接触外界抗原，成分相对稳定，免疫原性低，可减少对细胞培养的干扰，有利于维持心肌干细胞的正常生物学特性。

2.细胞培养过程中防止污染的措施有哪些？

保持操作环境无菌，如实验前用紫外线消毒超净台和培养箱，操作时在酒精灯火焰附近；使用无菌器材，包括培养基、耗材等；操作人员严格遵守无菌操作规范，穿戴工作服、口罩、手套；定期对培养细胞进行检查，及时发现并处理污染问题；合理添加抗生素，但不能过度依赖。

3.简述心肌干细胞鉴定的主要依据。

形态学上，心肌干细胞具有特定的细胞形态；免疫荧光检测其表面标志物，如c-kit等；通过流式细胞术分析细胞表面标志物的表达情况；利用RT-PCR和Westernblot技术检测相关基因和蛋白的表达，这些方法综合起来作为心肌干细胞鉴定的依据。

4.简述心肌干细胞冻存的步骤。

首先将处于对数生长期的心肌干细胞用胰蛋白酶消化制成细胞悬液，计数并调整细胞密度