定量检验的分析性能验证.pptVIP

对3个不同水平的质控品每个测定2次，测定均值与靶值的偏差小于卫生部临床检验中心室间质评的允许误差表示准确度可以接受第30页，共66页，星期日，2025年，2月5日三、可报告范围验证第31页，共66页，星期日，2025年，2月5日?线性范围（LinearRange)是指系统最终的输出值（浓度或活性）与被分析物的浓度成正比的范围。?分析测量范围（AnalyticalMeasurementRange）方法直接测量标本，而不需要任何的稀释、浓缩或者其它预处理等过程下，测量结果总误差符合要求的分析物浓度的范围。?临床可报告范围（ClinicallyReportableRange)是方法可采用对标本的稀释、浓缩或者其他预处理用于扩展直接分析测量下的分析物值的范围。第32页，共66页，星期日，2025年，2月5日可报告范围（ReportableRange）：实验室可建立或验证仪器或检测系统测量相应的准确度实验结果值的范围。第33页，共66页，星期日，2025年，2月5日?文件依据CLSI颁布的EP6-A文件《定量测量方法的线性评价》第34页，共66页，星期日，2025年，2月5日?仪器应有较好的测定精密度及不存在明显的携带污染等。对仪器应进行定期维护及校准，保证其处于正常状态。?试剂应注意试剂有效期及批号，不可采用过期试剂或不同批号的试剂。?校准品可采用与评价试剂配套的校准品。校准品的使用应严格按照产品说明，仪器校准步骤与间隔应按照本室的标准操作程序进行。第35页，共66页，星期日，2025年，2月5日?样品类型为避免基质效应对结果的影响，选用的样品应与临床实验样品相似，但不可采用含有对测定方法具有明确干扰作用物质的样品，如溶血、脂血、黄疸或含有某些特定药物的样品。样品物浓度应包括试剂厂商提供的试剂所能达到的线性范围。第36页，共66页，星期日，2025年，2月5日?样品制备收集临床检测过程中的高值样品（H）和低值样品(L)，若收集不到低值样品，可用生理盐水或蒸馏水替代。将H和L样品按：1L、3L+1H、2L+2H、1L+3H、1H关系各自配制(必要时可改变比例)混合，形成系列评价样品。第37页，共66页，星期日，2025年，2月5日?样品测定在进行线性范围确立时，应进行7-11个浓度水平的样品测定，每个样品重复测定2-4次。进行可报告范围验证时，应进行5个浓度水平的样品测定，每个样品重复测定2次。如果测定方法本身存在明显的携带污染，应根据实际情况采取恰当措施尽量避免对测定结果的影响。第38页，共66页，星期日，2025年，2月5日?结果分析1、以预期值为横坐标，以实测值为纵坐标进行线性回归，得到直线回归方程Y＝aX+b，a在0.97～1.03范围内，r2＞0.95；2、偏倚在允许误差范围之内。第39页，共66页，星期日，2025年，2月5日可报告范围的高限=可接受最大稀释倍数×线性范围（AMR）上限值；可报告范围的低限：线性范围的检测低限或功能灵敏度为可报告范围的低限。第40页，共66页，星期日，2025年，2月5日四、参考区间的验证第41页，共66页，星期日，2025年，2月5日验证已知参考区间在本实验室应用的可接受性。第42页，共66页，星期日，2025年，2月5日?实验方法1、从健康人群中抽出20个参考个体（最好能够覆盖各个年龄段），依照实验室标准操作规程检测样本。2、发现离群值应弃用，并新的参考个体代替，以确保测试结果不含离群值。第43页，共66页，星期日，2025年，2月5日3、如果20例参考个体中不超过2例（10％的结果）的检测值在参考区间外，则已知的参考区间可以接受。若3例以上超出界限，再选择20个参考个体进行验证，若少于或等于2个检测值超过已知参考限，则已知参考区间可以接受。若又有3个以上超出参考限，则就应该重新检查所用的分析程序，考虑两个样本总体生物学特征上可能存在差异，并且考虑是否按照大规模研究指南建立自己的参考区间。第44页，共66页，星期日，2025年，2月5日关键在于——筛选“健康人群”参考个体不应该是住院患者或者临床病人，除非绝对需要。诸如可能是必需的小儿科或老年人的研究。第45页，共66页，星期日，2025年，2月5日需要排除经常喝酒近期患病献血者哺乳期血压不正常肥胖吸毒特殊职业