高效液相色谱分析.pptVIP

高效液相色谱分析第1页，共35页，星期日，2025年，2月5日一、HPLC与经典LC区别主要区别：固定相差别，输液设备和检测手段1．经典LC：仅做为一种分离手段柱内径1~3cm，固定相粒径100μm且不均匀常压输送流动相柱效低（H↑，n↓）分析周期长无法在线检测2．HPLC：分离和分析柱内径2~6mm，固定相粒径10μm（球形,均匀装柱）高压输送流动相柱效高（H↓，n↑）分析时间大大缩短可以在线检测第2页，共35页，星期日，2025年，2月5日二、HPLC与GC差别相同：兼具分离和分析功能，均可以在线检测主要差别：分析对象的差别和流动相的差别1．分析对象GC：能气化、热稳定性好、且沸点较低的样品，高沸点、挥发性差、热稳定性差、离子型及高聚物的样品不可检测占有机物的20%HPLC：溶解后能制成溶液的样品，不受样品挥发性和热稳定性的限制相对分子质量大、难气化、热稳定性差及高分子和离子型样品均可检测用途广泛，占有机物的80%第3页，共35页，星期日，2025年，2月5日2．流动相差别GC：流动相为惰性气体组分与流动相无亲合作用力，只与固定相作用HPLC：流动相为液体流动相与组分间有亲合作用力，为提高柱的选择性、改善分离度增加了因素，对分离起很大作用流动相种类较多，选择余地广流动相极性和pH值的选择也对分离起到重要作用选用不同比例的两种或两种以上液体作为流动相可以增大分离选择性3．操作条件差别GC：加温操作HPLC：室温；高压（液体粘度大，峰展宽小）提高柱内填料装填的均匀性,减小粒度第4页，共35页，星期日，2025年，2月5日三、高效液相色谱仪流程图1．贮液器（滤去颗粒状物质）2．高压泵（15000~35000KPa)流量稳定及梯度洗提装置3．进样装置4．色谱柱——分离5．检测器——分析6．废液出口或组分收集器7．记录装置灵敏度高，重复性好、线性范围宽、死体积小以及对温度和流量的变化不敏感第5页，共35页，星期日，2025年，2月5日高效液相色谱仪的色谱柱内径：4.6mm或3.9mm；长度：15~30cm第6页，共35页，星期日，2025年，2月5日球形填料不规则形填料填料颗粒度：3~5μm湿法匀浆装柱技术第7页，共35页，星期日，2025年，2月5日空柱管:200-300元国产填料国产装填=800-1000元进口填料国产装填=1200-1500元原装进口柱=2400-3000元HPLC柱=空柱管+填料(分离介质)价格?第8页，共35页，星期日，2025年，2月5日检测器：紫外光度检测器、荧光检测器、示差折光检测器、电导检测器、蒸发光散射检测器第9页，共35页，星期日，2025年，2月5日高效液相色谱仪的生产厂家WatersAgillentShimadzPerkinElmerVarian大连依利特公司北京东西电子研究所制造商戴安第10页，共35页，星期日，2025年，2月5日第11页，共35页，星期日，2025年，2月5日高效液相色谱仪LC-2010HT

岛津（香港）有限公司第12页，共35页，星期日，2025年，2月5日新一代液相色谱∶AllianceAlliance第13页，共35页，星期日，2025年，2月5日产品名称：液相色谱仪器大连依利特返回第14页，共35页，星期日，2025年，2月5日四、HPLC的特点和应用“三高”“一快”“一广”高柱效(n=3万片/米),柱效高（远高于一般LC）高灵敏度(紫外检测器最小检出量达纳克级)高压(150*105~350*105Pa)分析速度快应用范围广泛（可分析80%有机化合物）第15页，共35页，星期日，2025年，2月5日HPLC应用医药方面：生物组织、血样、尿样分析，药剂组