第二章种子的扩大培养.pptVIP

**第1页，共40页，星期日，2025年，2月5日**第2页，共40页，星期日，2025年，2月5日第五节种子的扩大培养种子扩大培养的目的与任务种子制备与培养种子质量控制***第3页，共40页，星期日，2025年，2月5日种子扩大培养是指将保存在砂土管、冷冻干燥管中处休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化后，再经过扁瓶或摇瓶及种子罐逐级扩大培养,最终获得一定数量和质量的纯种过程。这些纯种培养物称为种子。种子扩大培养的概念:一、**第4页，共40页，星期日，2025年，2月5日二、种子扩培的目的接种量的需要菌种的驯化缩短发酵时间、保证生产水平**第5页，共40页，星期日，2025年，2月5日三、种子的要求及任务：总量及浓度能满足要求生理状况稳定，个体与群体活力强，移种至发酵罐后，能够迅速生长无杂菌污染**第6页，共40页，星期日，2025年，2月5日四、种子制备的过程。**第7页，共40页，星期日，2025年，2月5日**第8页，共40页，星期日，2025年，2月5日实验室阶段：不用种子罐，所用的设备为培养箱、摇床等实验室常见设备，在工厂这些培养过程一般都在菌种室完成，因此形象地将这些培养过程称为实验室阶段的种子培养。**第9页，共40页，星期日，2025年，2月5日生产车间阶段：种子培养在种子罐里面进行，一般在工厂归为发酵车间管理，因此形象地称这些培养过程为生产车间阶段**第10页，共40页，星期日，2025年，2月5日种子罐级数的确定谷氨酸：摇瓶→小罐（一级种子）→二级发酵青霉素：小罐（一级种子）→中罐（二级种子）→三级发酵制备种子逐级扩培的次数，一般由菌丝体培养开始计算发酵级数，但有时，工厂从第一级种子罐开始计算发酵级数**第11页，共40页，星期日，2025年，2月5日节约种子防变异**第12页，共40页，星期日，2025年，2月5日发酵级数确定的依据级数受发酵规模、菌体生长特性、接种量的影响级数大，难控制、易染菌、易变异，管理困难，一般2-4级。在发酵产品的放大中，反应级数的确定是非常重要的一个方面**第13页，共40页，星期日，2025年，2月5日

1、谷氨酸生产的种子制备

斜面菌种→一级种子培养→二级种子培养培养基：蛋白胨1%，牛肉膏1%，氯化钠0.5%琼脂2%，pH7.0-7.2培养条件：32℃，生长18-24小时葡萄糖2%，尿素0.5%，玉米浆2.5%，K2HPO40.1%32℃摇瓶培养12小时水解糖2.5%，尿素0.5%，玉米浆2.5%，K2HPO40.1%32℃种子罐培养7-10个小时**第14页，共40页，星期日，2025年，2月5日2、青霉素生产的种子制备斜面孢子→大米孢子→一级种子→二级种子→发酵培养基：甘油、葡萄糖、蛋白胨等培养条件：25℃、7天,湿度50%大米氮源（玉米浆）25℃、7天，控制湿度葡萄糖玉米浆27℃，40小时27℃、10-14小时葡萄糖玉米浆**第15页，共40页，星期日，2025年，2月5日三、种子培养方法1、表面培养法（surfaceculturing）：是一种好氧静置培养法。2、固体培养法(solidculturing)：3、液体深层培养(liquidsubmergedculturing)**第16页，共40页，星期日，2025年，2月5日固体培养又分为浅盘固体培养和深层固体培养，统称为曲法培养。它起源于我国酿造生产特有的传统制曲技术。其最大特点是固体曲的酶活力高。**第17页，共40页，星期日，2025年，2月5日3、液体深层培养(liquidsubmergedculturing)液体深层种子罐从罐底部通气，送入的空气由搅拌浆叶分散成微小气泡以促进氧的溶解。这种由罐底部通气搅拌的培养方法，相对于由气液界面靠自然扩散使氧溶解的表面培养法来讲，称为深层培养法。**第18页，共40页，星期日，2025年，2月5日（一）影响孢子质量因素1、培养基：产地、品种、加工方法、用量

四、影响种子质量的因素

2、温度和湿度3、培养时间和冷藏时