粳稻“日本晴”突变体库的构建及关键性状的遗传解析与应用探索.docxVIP

粳稻“日本晴”突变体库的构建及关键性状的遗传解析与应用探索

一、引言

1.1研究背景与目的

1.1.1研究背景

水稻（OryzasativaL.）作为全球最重要的粮食作物之一，是世界上一半以上人口的主食。其不仅在农业生产中占据着举足轻重的地位，还因基因组相对较小（约430Mbp）、拥有高效的遗传转化体系，以及与其他禾本科作物在基因组上存在明显的共线性，成为了研究单子叶植物的模式植物。国际水稻基因组计划（IRGSP）于1998年启动，以粳稻品种“日本晴”（Nipponbare）为模式材料，由多个国家共同参与，采用逐步克隆策略进行测序。2005年，水稻全基因组精确序列成功发表，这一成果为水稻的基因功能研究、遗传育种等提供了坚实的基础。

突变体是某个性状发生可遗传变异的材料，在水稻研究中具有不可或缺的作用。从应用角度来看，突变体为水稻育种提供了丰富的遗传资源。回顾水稻育种历程，半矮生基因sd1和细胞质雄性不育基因变异材料的鉴定与利用，实现了水稻产量的两次飞跃；光（温）敏核不育基因的发现，则推动了杂交水稻生产从三系到两系的转变。这些突破性成就充分彰显了特异突变材料在水稻育种中的关键价值。从理论研究层面而言，突变体是功能基因组学研究的必要条件。通过对突变体的研究，能够深入剖析基因的功能、调控机制以及它们在水稻生长发育、生理代谢等过程中的作用。

随着分子生物学技术的迅猛发展，创建水稻突变体库已成为功能基因组学研究的关键手段。突变体库的构建方法多种多样，包括化学诱变、物理诱变、T-DNA插入、转座子标签以及近年来兴起的基因编辑技术等。不同的构建方法各有优劣，化学诱变如甲基磺酸乙酯（EMS）诱变，具有操作简便、突变位点随机等特点，能够产生丰富的突变类型；物理诱变如γ射线辐射，可诱导染色体结构变异；T-DNA插入和转座子标签则能实现基因的定点突变，便于突变基因的克隆和鉴定；CRISPR-Cas9等基因编辑技术更是能够对特定基因进行精确编辑，大大提高了突变体创制的效率和精准性。

1.1.2研究目的

本研究旨在利用化学诱变剂甲基磺酸乙酯（EMS）构建粳稻“日本晴”突变体库，并对部分重要性状进行遗传分析。通过大规模的诱变处理和筛选，期望获得大量具有不同表型的突变体，丰富水稻的遗传多样性，为水稻基因功能研究提供宝贵的材料。同时，对筛选得到的突变体进行重要性状的遗传分析，明确突变性状的遗传规律，为后续的基因定位、克隆以及分子育种奠定坚实的理论基础。具体而言，本研究的目标包括：其一，通过EMS诱变处理粳稻“日本晴”种子，构建包含丰富突变类型的突变体库；其二，对突变体库中的突变体进行苗期、成株期等不同生长阶段的表型筛选，鉴定出具有重要农艺性状变异的突变体，如株高、叶形、穗型、粒型、抗逆性等；其三，运用遗传学方法对筛选出的突变体进行遗传分析，确定突变性状的遗传模式，判断其是由单基因还是多基因控制，以及基因的显隐性关系；其四，针对部分重要性状的突变体，开展等位性测定，探究不同突变体之间的遗传关系，为基因功能的深入研究提供依据。本研究的成果将有助于深入揭示水稻基因的功能和调控机制，推动水稻分子育种的发展，为培育高产、优质、抗逆的水稻新品种提供理论支持和技术支撑。

1.2国内外研究现状

在水稻突变体库创建方面，国内外取得了丰硕的成果。国外如韩国在2004年成功构建了由3万个水稻T-DNA插入突变体组成的群体，为水稻基因功能研究提供了大量材料。日本的Shimamoto实验室利用Ac/Ds转座子标签技术，创造了6000多个水稻突变体；Hirochiko实验室则应用逆转座子Tos-17构建了突变体群体。这些研究为水稻功能基因组学的发展奠定了基础。在国内，我国科研人员也积极投身于水稻突变体库的构建工作。T-DNA插入突变群体规模达到5万个株系以上，物理辐射突变体约有3万株，EMS化学诱变突变体约2万株。这些丰富的突变材料，为我国水稻基因功能研究和遗传育种提供了有力支持。

在水稻性状遗传分析领域，众多研究聚焦于重要农艺性状和抗逆性状。对于株高、分蘖数、穗型等农艺性状，通过构建遗传群体，利用分子标记技术，已成功定位了多个相关基因。例如，我国克隆的MOC1基因，对水稻分蘖的调控起着关键作用。在抗逆性状方面，针对水稻的抗病、抗虫、抗旱、耐盐等特性，也开展了大量研究。通过对突变体的遗传分析，揭示了部分抗逆基因的作用机制和遗传规律。

然而，当前研究仍存在一些不足之处。在突变体库创建方面，虽然已构建了多种类型的突变体库，但不同构建方法存在各自的局限性。T-DNA插入突变体库存在插入位点偏好性，且转化效率有待提高；化学诱变突变体库虽突变类型丰富，但突