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线虫线粒体形态功能研究方法创新

目录

文档概要．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

1.1研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

1.2国内外研究现状．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6

1.3研究目标与内容．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7

线虫线粒体概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8

2.1线虫线粒体的定义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11

2.2线虫线粒体的形态特征．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12

2.3线虫线粒体的功能特点．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13

线虫线粒体形态学研究方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15

3.1显微镜观察技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17

3.1.1光学显微镜技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21

3.1.2电子显微镜技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22

3.2线粒体形态分析软件．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26

3.2.1图像处理软件应用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27

3.2.2形态分析算法开发．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28

3.3线粒体形态测量与统计．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31

3.3.1线粒体尺寸测量．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31

3.3.2线粒体形态分布统计．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33

线虫线粒体功能研究方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．35

4.1线粒体呼吸链活性检测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．37

4.1.1线粒体呼吸链酶活性测定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．39

4.1.2线粒体呼吸链电子传递速率测定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．41

4.2线粒体能量代谢分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．43

4.2.1ATP合成速率测定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．44

4.2.2NADPH和FADH2的生成速率测定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．46

4.3线粒体抗氧化能力评估．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．47

4.3.1线粒体抗氧化酶活性测定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．48

4.3.2线粒体脂质过氧化水平测定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．50

线虫线粒体形态功能关系研究．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．51

5.1线粒体形态与功能相关性分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．54

5.1.1形态参数与功能指标关联性研究．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．60

5.1.2形态变异对功能影响的研究．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．62

5.2线粒体形态异常与疾病相关性研究．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．64

5.2.1线粒体形态异常与线粒体病相关性研究．．．．．．．．．．．．．．．．．．66

5.2.2线粒体形态异常与细胞凋亡相关性研究．．．．．．．．．．．．．．．．．．68

创新点与挑战．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．70

6.1研究方法的创新之处．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．71

6.2研究中遇到的挑战及解决方案．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．74

6.3未来研究方向展望．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．76

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