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无菌技术指南

无菌技术是通过一系列标准化操作防止微生物污染，确保医疗、实验室及工业生产中关键环节处于无菌状态的核心技术体系。其核心目标是阻断微生物传播途径，维持操作对象、环境及人员的无菌状态，广泛应用于外科手术、微生物培养、药品生产等领域。以下从基本原则、操作流程、环境控制、人员管理、物品管理及常见问题处理六个维度展开具体规范。

一、基本原则

1.无菌区域界定原则

操作前需明确划分无菌区与非无菌区。无菌区指经严格消毒且未被污染的区域，通常以无菌布单覆盖的器械台、手术野为中心，半径30cm范围内视为绝对无菌区；非无菌区包括人员背部、腰以下、肩以上及未覆盖无菌单的区域。任何非无菌物品或人员肢体不得进入无菌区，若需传递物品，应在距离无菌区边缘20cm外水平传递，避免跨越。

2.无菌物品管理原则

所有进入无菌区的物品必须为灭菌后未启封或启封后在有效期内的无菌物品。灭菌标识需完整（如压力蒸汽灭菌包外的化学指示胶带变色均匀，环氧乙烷灭菌包的化学指示卡呈特定颜色），包装无破损、潮湿或污渍。已开启的无菌物品（如无菌溶液）需在4小时内使用，未用完部分应标记开启时间并弃用；一次性无菌物品禁止重复使用。

3.人员行为规范原则

操作人员需严格遵循“静止-清洁-隔离”三要素：操作中避免大幅度转身、弯腰或走动，减少空气扰动；接触无菌物品前需完成外科手消毒（七步洗手法+消毒液擦拭至干燥），消毒后双手保持在腰部以上、肩以下，不可下垂或触碰非无菌物品；穿戴无菌手套时，手不可触及手套外表面，戴毕需检查手套完整性（轻挤指套，无漏气为合格）。

二、操作流程规范

（一）操作前准备阶段

1.环境预处理

操作前30分钟关闭门窗，停止无关人员进出。使用动态空气消毒机的环境需提前1小时开启，洁净手术室需提前30分钟启动净化系统（百级手术室需运行40分钟以上），确保空气沉降菌≤5CFU/皿（30分钟）、浮游菌≤150CFU/m3（百级标准）。用500mg/L含氯消毒液擦拭台面、设备表面及地面，重点清洁边角、缝隙，避免消毒液残留。

2.人员准备

操作人员需穿戴专用无菌服（分连体式和分体式，手术用需为防水材质）、一次性无菌口罩（覆盖口鼻，金属条贴紧鼻梁）、圆帽（完全覆盖头发）。外科手术人员需先完成更衣（换手术室专用鞋、裤，摘除首饰），再进行外科手消毒：用流动水冲洗双手至肘上10cm，取3-5ml皂液按七步洗手法揉搓2分钟，冲洗后用无菌擦手巾擦干；取5ml免冲洗消毒液均匀涂抹双手至肘上10cm，揉搓至干燥（约3分钟）。

3.物品核查

检查无菌包外标识（名称、灭菌日期、有效期、责任人），确认在有效期内（压力蒸汽灭菌包干燥环境下有效期7天，环氧乙烷灭菌包6个月）。无菌包若有潮湿、破损或标识不清，需重新灭菌。打开无菌包时，先解开系带，用无菌持物钳夹取包布外角，依次打开左右角，最后打开内角（手不可触及包布内面），铺无菌盘时，上层包布向四周展开，边缘下垂≥30cm。

（二）操作实施阶段

1.无菌器械传递

手术中器械护士与术者传递器械时，需将器械前端置于术者手掌上方5cm处，水平传递，避免器械尖端指向人员。传递锐器（如手术刀、缝针）时需使用弯盘，禁止徒手抛掷。实验室操作中，使用无菌吸管吸取液体时，吸管尖端不可触及容器口边缘，吸液后缓慢提出，避免液体滴落污染。

2.无菌区域维护

操作过程中，无菌布单若被血液、体液污染，需立即覆盖新的无菌单（覆盖范围超过污染区域边缘10cm）。手术野铺巾需至少4层，距切口边缘≥15cm，头侧铺巾应超过麻醉架，两侧及足侧超过手术台边缘。若需调整铺巾位置，只能由内向外移动，不可反向牵拉。

3.无菌溶液使用

开启无菌溶液时，先检查瓶身无裂缝，标签清晰。打开瓶盖后，用75%酒精消毒瓶口，手持瓶签面，先倒出5ml溶液冲洗瓶口，再将溶液缓慢倒入无菌容器中（瓶口距容器口2-3cm），倒液过程中瓶签始终朝上，不可将瓶口接触容器口。未用完的溶液需在瓶身标记开启时间（精确到分钟），2小时后弃用。

（三）操作结束阶段

1.物品处理

使用后的一次性无菌物品（如手套、纱布）放入黄色医疗废物袋，标注“感染性废物”；可重复使用的器械需在操作后30分钟内用酶清洁剂浸泡（水温30-40℃，浸泡10分钟），再进行超声清洗（频率40kHz，时间10分钟），干燥后包装灭菌。无菌包外的化学指示胶带需保留作为灭菌记录，保存期≥3年。

2.环境清洁

操作结束后，先清理台面可见污染物（用2000mg/L含氯消毒液擦拭），再用500mg/L含氯消毒液擦拭所有表面（包括设备按钮、开关），地面采用“Z”字形擦拭，每块抹布使用面积≤1m2，污染后及时更换。空气消毒机需继续运行30分钟，洁净手术室需关闭净化系统前运行15分钟完成自净。

三、环境控