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微生物育种与菌种保藏;一、微生物育种;遗传:;;1、出发菌株的选择
2、制备菌悬液
3、诱变处理选择恰当的诱变剂、适合的剂量,是诱变育种的关键。
(1)诱变剂的选择。诱变剂包括物理诱变剂和化学诱变剂。
(2)诱变剂量的选择。剂量常以杀菌率来表示。目前采用的剂量为杀菌率在30%~75%之间,出现正突变的几率较大。
4、筛选。;二、微生物菌种保藏;一.菌种的衰退与复壮
1.衰退(degeneration):
菌种在培养或保藏过程中,由于自发突变的存在,出现某些原有优良生产性状的劣化、遗传标记的丢失等现象,称为菌种的衰退。
衰退的原因:①基因突变,②分离现象。
常见的衰退现象:
菌落和细胞形态的改变;
抵抗力、抗不良环境能力减弱等。
代谢产物生产能力或其对宿主寄生能力下降;;2.防止菌种衰退的方法:
①控制传代次数
②选择合适的培养条件;
③采用不同类型的细胞进行传代;
④采用有效的菌种保藏方法。;3.菌种的复壮(rejuvenation):
衰退的菌种恢复原来优良性状。
菌种的复壮措施:
①纯种分离:(平板划线法、涂布法、倾注法、单细胞挑取法等)。
②通过寄主体内生长进行复壮(如Bacillusthuringiensis的复壮);
③淘汰已衰退的个体(采用比较激烈的理化条件进行处理,以杀死生命力较差的已衰退个体)。
;4菌种保藏:
(1)目的:
①存活,不丢失,不污染
②防止优良性状丧失
③随时为生产、科研提供优良菌种
(2)原理:选用优良的纯种,(最好是休眠体,如分生孢子、芽胞等),创造降低微生物代谢活动强度,生长繁殖受抑制,难以发生突变的环境条件。(其环境要素是干燥、低温、缺氧、缺营养等)
;问题:
微生物还有哪些保藏方法,有何优缺点?
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