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培黎职业学院现代农业学院
1、MS培养基的制作与灭菌5、马铃薯组培苗快繁中常见问题
2、马铃薯脱毒苗的制取6、马铃薯组培苗驯化、移栽
3、马铃薯脱毒苗的鉴定7、马铃薯组培苗工厂化经营管理
4、马铃薯组培苗继代培养
项目四
任务一继代培养无菌操作流程
任务二接种注意事项
继代培养的定义
是指使用的植物材
料作为外植体，为进行或等而进
行的环节。由于外植体已经处于无菌环境
中，故不需要进行外植体灭菌环节。
马铃薯组培苗继代培养采用单茎段转接方法，
原则上带有1-2个叶片，茎段长度控制在1-2cm。
任务一继代培养无菌操作流程
1、环境灭菌
接种人员进入缓冲间更换工作服，带好口罩、帽子，换鞋，洗手，进入
风淋室，进行消毒灭菌。
任务一继代培养无菌操作流程
1、环境灭菌
然后进入接种室，将提前高温高压灭菌过的工具插入消毒器并打开超净
工作台的紫外灯，随后用75%酒精或84消毒液进行接种室空间降尘，后退出接
种室，关门，并打开接种室、缓冲间的紫外灯，等待灭菌30分钟。
任务一继代培养无菌操作流程
2、接种前的准备工作
关闭紫外灯，打开日光灯及风机；
75%酒精擦拭双手、台面，用酒精灯烘烤培养皿，从灭菌器中取出接种工
具。
任务一继代培养无菌操作流程
3、接种
打开取出马铃薯切成带有插入新
封口
母苗瓶脱毒苗1-2个叶片的培养
的茎段基瓶中
任务一继代培养无菌操作流程
4、接种后的标识与记录
任务二注意事项
1.防止交叉污染
（1）剪下的(2）每切割完1瓶（3）接种工具手（4）接种工具每
茎段不可重叠母苗或无菌滤纸较握的部位不能靠前；次使用前用酒精
放置；湿、有破损应及时灯或高温灭菌器
更换滤纸；灭菌。
任务二注意事项
2.台面用具规范摆放
消毒器、装有75%酒精的消毒
瓶、冷却架、酒精棉瓶、喷壶等工
具置于台面惯用手侧；培养基、母
苗瓶等其他物品置于相对一侧；无
菌培养皿、酒精灯放于人员正前方，
酒精灯朝内。
任务二注意事项
3.在酒精灯火焰的有效范围内操作
4.接种工具灼烧后充分冷却，防止烫伤组培苗
5.接种时夹取组培苗用力要适当，组培苗和手指不能触及瓶口
6.手臂勿在培养基、接种器上方经过
7.无菌操作时不要讲话，双手不要超出超净工作台边缘
小结
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