马铃薯组培技术指导.pdfVIP

培黎职业学院现代农业学院

1、MS培养基的制作与灭菌5、马铃薯组培苗快繁中常见问题

2、马铃薯脱毒苗的制取6、马铃薯组培苗驯化、移栽

3、马铃薯脱毒苗的鉴定7、马铃薯组培苗工厂化经营管理

4、马铃薯组培苗继代培养

项目五

任务一污染问题及预防措施

任务二玻璃化问题及预防措施

任务三褐变问题及解决方法

任务四其它问题

是在植物组织培养过程中，由于细菌、真菌等微生物的侵染，

在培养基表面滋生大量菌斑，造成培养材料不能生长和发育的现象。

是马铃薯组培苗快繁中最常见和首要解决的问题。

细菌性污染真菌性污染

操作人员在操作过程中未严格

遵循无菌操作的原则

3

材料带菌24环境不清洁

15操作设备及使用工

培养基灭菌不彻底

具消毒不彻底

1.要减少或防止材料带菌

具有品种的典型特征、块茎具有品种代表性、健壮的芽

健壮、无病虫害无病斑、无机械创伤

2.外植体的灭菌要彻底

酒精浸泡10~30s0.1%升汞浸泡5-10min

0204

010305

流水冲洗30min无菌水漂洗3~5次无菌水漂洗3~5次

3.培养基和接种器械彻底灭菌

培养基和接种器械灭菌接种工具在操作中经常用酒精灯或高温灭菌器灭菌

保证灭菌时间和灭菌温度，灭菌时高压灭菌锅的冷空气要彻底排放干净

4.严格无菌操作

接种人员注意个人卫生；

在酒精灯的有效范围内操作；

接种时，双手不能离开台面；

接种时开瓶和封口的动作要轻、要快；

尽量避免在接种用具和培养皿、揭开的培养瓶上方移动；

操作区不要一次放入过多的空培养基。

5.保持环境清洁

培养室和接种室定期灭菌；

及时捡出污染的组培材料；

定期清洗或更换超净台过滤器；

经常用擦拭或喷雾方式清洁超净工作台；

严格控制人员频繁出入培养室。

当植物材料不断地进行离体繁殖时，试管苗

的茎、叶变成半透明水浸状，生长畸形，繁殖系

数明显下降，难以诱导生根，即使诱导生根，其

根系质量差，移栽成活率极低，这种现象通常称

为玻璃化。

是植物组织培养过程中所特有的一种生理失

调或生理病变。

玻璃化苗特点：

整株矮小肿胀、失

绿；叶片皱缩成纵向卷曲、脆弱易碎；

叶表缺少角质层蜡质，没有功能性气孔，

不具有栅栏组织，仅有海绵组织。

玻璃化苗体内含水量与

可溶性糖含量高，但干物质、叶绿素、蛋

白质、纤维素和