香菇多糖黄原胶结冷胶文档.pptVIP

香菇多糖黄原胶结冷胶;。

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一、香菇的预处理

一般用于多糖提取的香菇子实体通常是干品,将无霉变和虫蛀的优质香菇子实体置于60℃左右的条件下干燥,以利于粉碎，粉碎后过20～80目筛。由于香菇的脂肪含量约为干重的2%～4%,因此一般不考虑脂肪对香菇提取的影响,但也有研究采用石油醚、乙醇等除去原料中的脂肪成分。;香菇多糖的制备方法

二、香菇多糖的提取

香菇多糖一般采用不同温度的水或稀碱溶液提取。在其浸提参数中,温度是影响多糖提取的主要因素。

香菇多糖的提取方法有：

热水浸提法、稀酸（碱）浸提法、酶解

法、超声波提取法、微波提取法。;香菇多糖的制备方法

提取方法

浸提法是提取香菇多糖最常用的方法，

热水浸提法

香菇粉→加蒸馏水→90℃水浴提取→静置→过滤→滤液浓缩→加入乙醇→充分混匀→静置→离心→取上清浓缩→加入甲醇→静置→离心→得沉淀→加甲醇、乙醚洗涤后→自然风干→得粗香菇多糖→称重

热水浸提法是目前工业生产提取的主要手段，

但工艺提取时间长。提取效率不高。;香菇多糖的制备方法

稀酸（碱）提取法

由于酸对多糖的糖苷键有破坏作用,故一般采用稀碱作为浸提剂。碱浸提通常采用NaOH作为浸提液。

从稀酸、碱液法提取易造成香菇多糖水解，碱可以通过破坏细胞壁而使酸性多糖溶出，但所提取出来的多糖成分比较复杂，提取过程部分多糖会发生水解导致多糖活性结构遭到破坏，降低了多糖的提取率。这种方法应用较少。;香菇多糖的制备方法

酶解法是一些生物或者物理的辅助方法

酶提取法的原理是利用蛋白酶对细胞壁的降解作用，减小细胞壁对多糖溶出的阻碍，从而提高多糖提取率。采用的酶制剂可以是单酶，也可以是多种蛋白酶（果胶酶、中性蛋白酶和纤维素酶）按照一定比例混合的复合酶。

该法具有得率高、条件温和等优点，但由于蛋白酶制剂的价格比较高，会增加提取工艺成本，不利于大规模生产应用;香菇多糖的制备方法

超声提取法??利用超声波产生强烈振动，破坏香菇多糖细胞壁，加速多糖释放.

可以缩短提取时间，降低提取液的黏度，提高提取效率。但超声功率过大会引起多糖分子的降解，导致多糖性质发生变化。

超声提取法具有能耗低、时间短、效率高等特点，近年来被广泛应用于实验室的植物多糖提取，对于超声提取的研究也比较多。;香菇多糖的制备方法

微波提取法

微波提取时水分吸收微波能，使得细胞内的温度上升，从内向外对香菇进行加热，同时液态水的气化产生的压力瞬加穿透香菇，破坏香菇的细胞壁，香菇中的多糖成分就从细胞中溶出来。

微波提取法与传统加热技术相比具有节能高效、均匀性好、易于控制等，此方法有重现性好、操作性强、热效率高等优点。

微波法被广泛应用于食品领域;三、香菇多糖的脱色处理

提取的香菇多糖溶液,一般含有较深的颜色,色素的存在影响纯度和理论研究,因此要尽量去除。常用的脱色方法有H2O2、活性炭法和离子交换树脂法。

多糖脱色是多糖纯化的一个关键工艺,主要采用活性炭吸附脱色,该方法脱色效果一般,活性炭对多糖的吸附严重。H202虽然脱色效果不错,但存在着多糖降解的问题,这很可能影响多糖的生物活性。离子交换树脂通常使用DEAE纤维素柱,由于DEAE纤维素价格昂贵,一般只能在理论研究中提取高纯度多糖使用,在工业化生产中不能得以应用。;四、香菇多糖中粗蛋白的去除

经乙醇沉淀后的粗多糖中蛋白质的含量较高,常用Sevag法脱除蛋白,。

将多糖水溶液1/5体积加入氯仿,随之再加入氯仿体积1/5的正丁醇。混合物剧烈振摇20min,离心,倾出上层清液,除去中间层变性蛋白和下层氯仿。

将Sevag法结合酶法去蛋白效率可提高68%,且可以节省大量的试剂和时间;五、香菇多糖的分离纯化及纯度鉴定

多糖的分离纯化及纯度鉴定是进一步研究多糖的必要步骤,纯化的过程一般先用有机溶剂如乙醇等进行反复洗涤沉淀，除去醇溶的部分杂质;纯化后得到的多糖分子量分布很宽，需要进行分级来得到一定分子量范围的具有较强生物活性的多糖

常用的纯化方法有:分级沉淀法、柱层析法、超滤法等。;分级沉淀法

分级沉淀法是利用多糖溶解度的分子量依赖性进行分离的,常采用的沉淀剂有甲醇、乙醇等。脱完蛋白后的1%香菇多糖溶液加入0.5倍的甲醇醇析后,上清液再继续滴加甲醇至1倍体积,得到两种不同的多糖级分

但这种方法适宜分离各种溶解度相差较大的多糖。工业用的主要是分级沉淀法，但是操作繁琐，效率不高

;凝胶色谱法

是以不同浓度的盐溶液和缓冲溶液作为洗脱剂,使不同大小的多糖分子得到分离纯化。

常用的凝胶有葡聚糖凝胶(Sepha