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第十五章免疫学应用

第一节第二节第三节目录免疫学诊断免疫学预防免疫学治疗

学习目标具备严谨认真的工作态度，具有服务社会、守护群体健康的职业精神。素质目标说出抗原抗体反应的概念和特点；理解常见抗原抗体反应类型、免疫学治疗的原理；列举人工主动与被动免疫的生物制品，比较人工主动免疫和人工被动免疫的比较点。知识目标能解释相关免疫学诊断、治疗的相应原理。能力目标

第一节免疫学诊断

一、抗原抗体反应特点（一）高度特异性由抗原表位与抗体分子中的超变区互补结合所决定的。（二）可逆性抗原抗体结合除了空间构象互补外，主要以氢键、静电引力、范德华力和疏水键等非共价方式结合。这种非共价键易受温度、酸碱度和离子强度的影响而解离。

抗原抗体在体外结合后能否出现肉眼可见的反应取决于两者适当的浓度和比例。故在具体实验过程中要适当稀释抗原或抗体，以调整两者浓度和比例，使其出现最大复合物。抗原抗体反应可分为两个阶段：1.第一阶段：是抗原抗体特异性结合阶段，该反应迅速，可在数秒至几分钟内完成，一般不出现肉眼可见的反应。2.第二阶段：为可见反应阶段，是小的抗原抗体复合物之间通过正、负电荷吸引形成较大复合物的过程。此阶段所需时间从数分钟、数小时至数日不等。（三）比例性（四）两个阶段

二、抗原抗体反应的影响因素抗原、抗体在适当浓度的电解质会使他们出现肉眼可见的凝集块或沉淀物。实验中常用0.85％的NaCl或其他离子溶液作稀释液，以提供适当浓度的电解质。适当提高反应的温度可加速抗原抗体复合物的形成。在一定范围内，温度越高，形成可见反应的速度越快。通常37C是抗原抗体反应的最适温度。抗原抗体反应的最适pH在6～8之间，PH过高或过低，可出现假阳性或假阴性。（一）电解质（二）温度（三）酸碱度

三、抗原抗体的检测抗原、抗体在适当浓度的电解质会使他们出现肉眼可见的凝集块或沉淀物。实验中常用0.85％的NaCl或其他离子溶液作稀释液，以提供适当浓度的电解质。（一）凝集反应1.直接凝集反应①玻片凝集反应，用已知抗体检测未知抗原，如鉴定细菌、鉴定血型等。②试管凝集反应，用已知抗原测定被检血清中有无抗体及其相对含量，如诊断伤寒、副伤寒的肥达试验等。

直接凝集反应红细胞抗红细胞抗体凝集

2.间接凝集反应是将可溶性抗原或抗体吸附于与免疫无关的载体上，使之成为致敏载体颗粒后，与相应抗体或抗原作用出现的凝集反应。①间接凝集试验，用已知抗原(或抗体)吸附于载体再去检测未知抗体(或抗原)，如检测病原微生物及相关抗体、抗核抗体等。②间接凝集抑制试验，先将可溶性抗原与相应抗体作用，然后再加入抗原致敏颗粒（即吸附相同可溶性抗原的乳胶颗粒），如果抗体已被可溶性抗原结合，则致敏颗粒不发生凝集现象。

（二）沉淀反应可溶性抗原（如血清蛋白质、细胞浸出液）与相应抗体在两者比例合适时结合，形成较大的不溶性免疫复合物，从而出现肉眼可见的沉淀物的反应称沉淀反应(precipitation)。检测方法有多种：（1）单向琼脂扩散试验（2）双向琼脂扩散试验（3）对流免疫电泳(counterimmunoelectrophoresis,CIEP)是将双向扩散和电泳技术相结合的检测方法。

（三）免疫标记技术是用荧光素、酶或放射性核素等标记物标记抗体或抗原进行的抗原抗体反应，是目前应用最广泛的免疫学检测技术之一。此法的优点是快速、可定性或定量测定。免疫标记技术极大提高了免疫学检测的敏感性，与显微技术结合能对组织或细胞内的待测物质精确定位。

1.免疫荧光技术（immunofluorescencetechnique，IF）是用荧光素标记抗体或抗原，以检测抗原或抗体的方法。①直接法，此法优点是特异性高、快速。缺点是每检测一种抗原，就必需制备一种相应的特异性荧光抗体。②间接法，可用于检测抗原或抗体。此法优点是制备一种荧光抗体，可用于多种抗原抗体系统检测。直接荧光法间接荧光法荧光标记免疫荧光技术

2.酶免疫测定法（enzymeimmunoassay，EIA）又称酶免疫技术，是将酶促反应与抗原抗体反应相结合的检测技术。常用方法为酶联免疫吸附试验（enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA）。ELISA常用方法有：①双抗体夹心法，用于检测标本中的抗原；②间接法，用于检测标本中的抗体。

酶E双抗体夹心法包被已知抗体加入酶标记的抗体加入待测抗原包被已知抗原加入酶标记的抗抗体（二抗）加入