亚甲蓝病毒灭活血浆的质量测专家讲座.pptxVIP

亚甲蓝病毒灭活血浆的质量测专家讲座

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血浆病毒灭活必要性

伴随血液检测技术进步和血液管理办法完善，当前HBsAg、抗-HCV、抗-HIV检测在很大程度上降低了输血造成病毒传输几率，但因为

1病毒变异造成免疫反应性改变；

2免疫静默感染；

3检测技术存在窗口期漏检不足；

4检测病原体种类局限；

输血引发艾滋病病毒（HIV、HCV、HBV）风险尚不能完全杜绝；不常见病毒如人类T淋巴细胞白血病病毒（HTLV）、西尼罗病毒（WNV）、EB病毒等在大多数国家均未被列入血液常规检测。现有检测伎俩不能完全排除血浆中可能存在未知病毒。

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血浆制品病毒去除方法：

乙醇沉淀

深层过滤

离子交换色谱和亲和层析色谱

纳米膜过滤

纳米膜过滤技术

单一病毒灭活/去除方法即使能很好起处处理病毒效果，不过无法灭活和去除全部病毒，如细小病毒B19、VIR918、PARV4、SV40和PrPSc。

主要在血浆蛋白分离工艺中应用

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血浆病毒灭活方法

有机溶剂/去污剂（S/D）法

热处理

蒸汽处理法

终端干热法

低pH孵放法

辛酸处理法

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亚甲蓝病毒灭活技术原理

亚甲蓝又名美蓝，分子量319185，是一个光敏剂，吩噻嗪类染料，其最大吸收峰为670nm，临床上常作为解毒剂，用于治疗亚硝酸盐中毒引发高铁血红蛋白血症和氰化物中毒。

亚甲蓝表面携带正电荷，与病毒核酸结合后能够嵌入DNA/RNA中，与病毒核酸带负电荷G-C碱基对相结合。在有光照条件下，亚甲蓝分子吸收光能后可激发产生单态分子氧，这种单态分子氧经过修饰鸟嘌呤碱基而影响核酸，使其产生缺口，引发核酸链断裂或造成碱基位点丢失，从而阻止其复制,到达灭活病毒目标。

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与脂膜和蛋白质结合

对核酸有较高亲和性

亚甲蓝为多靶点光敏剂，光照射产生单线态氧和羟自由基引发广泛损伤

亚甲蓝可与病毒核酸与脂质包膜相结合，在可见光作用下，可使病毒核酸断裂，包膜破损，因而能杀灭包含艾滋病病毒（HIV）、乙肝病毒（HBV）、丙肝病毒（HCV）等脂质包膜病毒和部分非脂质包膜病毒。

对亚甲兰光化学法病毒灭活有效性研究显示，血浆中指示病毒滴度显著下降，血浆中病毒含量下降了6个数量级，可能残留病毒量低于百万分之一，到达了国际公认血浆病毒灭活有效性指标，也符合卫生部关于血浆制品病毒灭活相关要求。

亚甲蓝病毒灭活技术原理

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美国AABB技术手册描述了病原体灭活血浆制品，介绍了欧盟开展三种病毒灭活方法，其中包含亚甲蓝、核黄素和补骨脂素。但美国未开展。

欧盟指南中描述了病原体灭活FFP制品质量要求，同时也介绍了三种方法。

英国指南中明确描述了亚甲蓝处理和去除FFP制品质量要求，质量要求中对亚甲蓝残留量要求为≤0.3umol/L，与我们国家标准一致。

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一次性使用血浆病毒灭活输血过滤器

Depasse最早提出了“过滤器应用”，极大地简化和改进了MB-P法操作，为MB-P法由试验室走向临床迈出了主要一步。

当前使用一次性使用血浆病毒灭活输血过滤器主要由亚甲蓝添加元件、光照袋、过滤器、血浆储存袋和连接管路组成，是一个简便、实用血浆灭活器材。

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亚甲蓝作为一个外来物质进入人体后，对人体潜在影响尚不可知。若病毒灭活血浆中残留过多亚甲蓝，还会造成血浆外观和色泽显著改变，使病人输注时可能产生心理负担。

在确保灭活所需有效浓度下，要尽可能降低其残留量，因而对病毒灭活血浆中亚甲蓝残留量/率进行控制很有必要。选择适当亚甲蓝含量测定方法很主要。

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医用病毒灭活箱应用

当前医用病毒灭活箱是用于光照灭活时专用设备，它集光源、温控、机械摆动等装置于一身，能够依据需要设定照射强度、照射温度、照射时间和摆动频率等很多条件，使用方便。

光源选择：荧光灯

（1）单位时间内照射所释放热量较低；

（2）到达相同灭活效果照射时间最短；

（3）波长接600~700nm。

照射方式：有效光照强度范围在30000~40000lx。

（1）放置血袋托盘为钢丝结构，有较大空隙，使血袋两面都能够接收照射；

（2）照射过程中托盘以60±2次/