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实践操作二高压蒸汽灭菌锅的使用咸宁职业技术学院王志勇
目录一、目的要求二、方法原理三、设备四、操作方法与步骤五、思考题
1.理解高压蒸汽灭菌锅的工作原理。一、目的要求2.掌握高压蒸汽灭菌锅的使用方法。
在密闭的高压蒸汽灭菌锅内,其内的蒸汽不能增加致压力不断上升,使高压下水的沸点不断提高,进而使锅内温度增加。在0.1MPa的压力下,锅内温度达121℃。在此蒸汽温度下可有效杀灭各种普通微生物及高度耐热的芽孢和微生物孢子。?二、方法原理
高压蒸汽灭菌锅三、设备
灭菌锅上一般附有安全阀(6)、压力表(8)、排气阀(9)、加水口、排水口(19)等。四、操作方法与步骤1.高压蒸汽灭菌锅的一般构造脚轮胶木柄压力表放气阀上法兰容器盖灭菌网篮外桶搁脚电热管放汽管防水柄桶身外壳面板下法兰蝶形螺母安全阀电源线保险丝
2.高压蒸汽灭菌的操作过程如不按照操作规程或使用说明会导致高压蒸汽灭菌锅具有一定的危险性,也可能会造成灭菌效果不好的结果。不同型号的高压蒸汽灭菌锅在操作上会有一些小的差异,但大多数都大同小异,使用者首次使用前必需在认真阅读使用说明书后,在专业人员的指导下进行操作。四、操作方法与步骤使用说明书
(1)加水将灭菌锅内层灭菌桶取出,再向外层锅内加入适量的水,以水面与三角架相平为宜。立式锅是直接加水至锅内底部隔板以下1/3处。有加水口者由加水口加入至止水线处。目前全自动的高压蒸汽灭菌锅打开电源启动灭菌程序时会自动上水至灭菌水位。四、操作方法与步骤
(2)装料将装料桶放回锅内,装入待灭菌的物品。放置装有培养基的容器时要防止液体溢出,瓶塞不要紧贴桶壁,以防冷凝水沾湿棉塞。装量一般为容器的80%。四、操作方法与步骤
(3)盖盖摆正锅盖,对齐螺口,然后同时对称地旋紧相对的螺栓,打开排气阀(如为全自动高压蒸汽灭菌锅可无需打开排气阀)。四、操作方法与步骤(4)设置根据灭菌对象的多少、大小设置灭菌条件。一般为121℃30min,如对象体积较大,可适当增加灭菌强度。设置完毕即开始加热灭菌。
(5)排气加热至水煮沸后,水蒸气和空气一起从排气孔排出。一般认为,当排气流很强并有嘘声时,表明锅内空气已排净(沸后约5min),全自动高压蒸汽灭菌锅会自动排放冷空气。(6)升压当锅内空气排净时,即可关闭排气阀,压力开始上升。(7)保压当压力表指针达到所需压力刻度时,控制热源,开始计时并维持压力至所需时间。本实训用121℃、20rnin灭菌。四、操作方法与步骤
(8)降压达到所需灭菌时间后,关闭热源,让压力自然下降到零后,打开排气阀。放净余下的蒸汽后,再打开锅盖,取出灭菌物品,排掉锅内剩余水。(9)无菌检查将已灭菌培养基冷却后置于37℃恒温箱内培养24h,若无菌生长,则放人冰箱或阴凉处保存备用。四、操作方法与步骤
3.注意事项(1)使用高压灭菌锅应严格按照操作程序进行,避免发生事故;灭菌时,操作者切勿擅自离开;务必待压力降到零后,才可打开锅盖。(2)干热灭菌时电烘箱中物品不要摆得太拥挤,以免阻碍空气流通而影响灭菌效果;灭菌物品不要与电烘箱内壁的铁板接触,以防包装纸烤焦。(3)高压蒸汽灭菌时务必要先排除冷空气。四、操作方法与步骤
1.高压蒸汽灭菌时为什么要先排除冷空气?不排除冷空气会如何?2.培养基配制完成后,为什么必须立即灭菌?已灭菌的培养基如何进行灭菌检查?五、思考题
感谢观看课件中部分素材来源于网络,仅供教学使用。
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