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环状沉淀试验
环状沉淀试验环状沉淀试验是在两种液体界面上进行的试验,是最简单、最古老的一种沉淀试验,目前仍广泛使用。方法为在小口径试管中加入已知沉淀素血清,然后小心沿管壁加入等量待检抗原于血清表面,使之成为分界清晰的两层。数分钟后,两层液面交界处出现白色环状沉淀,即为阳性反应。试验中要设阴性、阳性对照。本法主要用于抗原的定性试验,如诊断炭疽的Ascoli氏反应、链球菌的血清型鉴定、血痕鉴定等。环状沉淀试验
环状沉淀试验环状沉淀试验以炭疽检疫为例介绍环状沉淀试验。炭疽由炭疽杆菌感染所致,是一种人畜共患的急性传染病。人因接触病畜及其产品及食用病畜的肉类而发生感染。临床上主要表现为皮肤坏死、溃疡、焦痂和周围组织广泛水肿及毒血症症状,皮下及浆膜下结缔组织出血性浸润;血液凝固不良,呈煤焦油样,偶可引致肺、肠和脑膜的急性感染,并可伴发败血症。
环状沉淀试验环状沉淀试验沉淀试验所用抗原必须为可溶性抗原,可溶性抗原的制备有两种方法:热浸出法和冷浸出法。
环状沉淀试验热浸出法:取疑似病料(实质脏器:不可随意采集)1-2g,在乳钵内剪碎、研磨,然后加入5-10ml生理盐水,煮沸30min,冷却后用滤纸过滤,透明的滤液即为被检抗原。冷浸出法:待检皮张37℃温箱烘干,高压蒸汽灭菌,剪成小块称重,然后加入5-10倍石炭酸生理盐水,室温或4℃冰箱下浸泡18-24h,滤纸过滤2-3次,透明的滤液即为被检抗原。
环状沉淀试验先用毛细吸管在小试管底部加1/3试管的炭疽沉淀素血清;倾斜小试管;再用毛细吸管沿小试管壁缓慢加入1/3试管的可溶性被检抗原;静置,5-10min内判定结果。白色沉淀环1/3V可溶性被检抗原1/3V炭疽沉淀素血清结果分析:如病料中含有炭疽杆菌,则在抗原抗体在液面交界处形成一个白色沉淀环。
环状沉淀试验须同时设置标准抗原和生理盐水对照;被检抗原必须为可溶性抗原;抗原的加入方法为叠加,不能与血清混合;判定结果时小试管应静置,不能晃动。此方法不适合于猪(局限性咽炎、形态变异)。注意事项
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