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T/GDAAV0212—2025

鸡球虫卵囊基因组DNA提取方法

编制说明

一、任务来源（包括目的意义）

鸡球虫病是由艾美耳属球虫寄生于鸡肠道上皮细胞引起的一种急性流行性原虫病，是危害养鸡

业最严重的寄生虫病之一。该病广泛分布于世界各地，我国各地均有发生，给养鸡业造成巨大经济

损失。据统计，全球每年因鸡球虫病造成的直接经济损失超过30亿美元，我国每年损失超过20亿

元人民币。

鸡球虫病的准确诊断是有效防控的前提。传统的形态学鉴定方法虽然直观，但需要丰富的专业

知识和经验，且难以区分形态相似的虫种。分子生物学鉴定方法具有快速、准确、敏感的优点，已

成为球虫鉴定的重要手段。然而，球虫卵囊具有坚硬的卵囊壁，常规DNA提取方法难以有效破碎卵

囊壁，导致DNA提取效率低、纯度差，影响后续分子生物学检测的准确性。目前国内外尚无统一、

规范的鸡球虫卵囊基因组DNA提取方法标准，各实验室采用的方法差异较大，缺乏可比性和重现性。

为解决鸡球虫卵囊DNA提取方法不统一、不规范的问题，提高分子生物学鉴定的准确性和可靠

性，广东省农业科学院动物卫生研究所、中农华威制药股份有限公司于2025年4月向广东省畜牧兽

医学会提出了《鸡球虫卵囊基因组DNA提取方法》的团体标准立项申请。广东省畜牧兽医学会组织

了对该标准的预研工作，并于2025年10月14日组织专家对立项申请进行了论证审查。经过专家充

分的研讨论证，专家组一致认为，该项目所提供的资料基本齐全，论证充分，符合国家产业发展需

求，所申报的团体标准满足立项条件，同意该标准立项。目前，本标准研究团队已经完成了标准主

要技术参数与指标的试验验证，形成了标准文本初稿。

二、起草工作简要过程（含主要参加单位及工作组成员）

1.标准起草阶段

为制定本标准，项目组织技术人员查阅了大量国内外文献资料，包括鸡球虫病诊断技术、寄生

虫DNA提取方法、分子生物学鉴定技术等相关技术专著、学术论文、国家标准、行业标准等，并进

行了深入的预研讨论工作。

本项目主要开展了以下研究工作：

（1）系统比较了不同样品来源（粪便样品、纯化卵囊、保存卵囊）的前处理方法；

（2）优化了卵囊破碎方法，包括玻璃珠处理法和裂解液处理法的参数；

（3）比较了酚-氯仿法、DNA提取试剂盒法、热处理法三种提取方法的效果；

（4）验证了各方法提取DNA的浓度、纯度和完整性；

（5）评估了不同方法的适用范围和优缺点。

本研究使用的试剂均为同批次产品或市售标准品，确保了试验的一致性和可重复性。2025年7

月，我们初步完成了标准的起草并送交同行专家审定。

2.标准参与单位和参与人员

文件起草单位包括广东省农业科学院动物卫生研究所、中农华威制药股份有限公司。

本文件主要起草人为蔡海明、孙铭飞、游锡火、廖申权、戚南山、李娟、林栩慧、吕敏娜、宋勇

乐、陈祥杰、朱易斌、张健騑、何钦义、曾徐浩。

文件起草的具体分工如下：

蔡海明：项目负责人，负责标准的立项、整体方案确立及宣贯，负责标准的审阅、项目申报建

议及相关技术文件的校订。

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孙铭飞：负责标准中方法建立、实验数据分析起草，负责各版本标准稿的讨论和修订工作及征

求意见后的修改工作。

游锡火、廖申权：负责标准中部分实验室方法的建立、优化及验证。

戚南山、李娟：负责标准中部分方法的起草、验证。

林栩慧、吕敏娜、宋勇乐：负责试剂配制、样品前处理方法的验证。

陈祥杰、朱易斌、张健騑：负责DNA提取方法的对比验证及质量检测方法的验证。

何钦义、曾徐浩：负责部分标准方法的验证及推广应用。

三、编写原则和确定标准主要内容的依据

（一）框架的确定

根据鸡球虫卵囊基因组DNA提取方法的技术特点，结合GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1

部分：标准化文件的结构和起草规则》的要求，确定标准的框架为：范围、术语和定义、规范性引用

文件、缩略语、操作程序（包括样品前处理与纯化、样品的裂解、基因组DNA提