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哺乳动物组织中酶的最适温度多在35~40℃之间TaqDNA聚合酶最适温度为72℃*低温的应用一般的酶在低温下活性降低,但酶本身不被破坏,其活性可随温度的回升而恢复低温保存酶和菌种等生物制品低温麻醉第94页,共160页,星期日,2025年,2月5日五、pH对酶促反应速率的影响pH对几种酶活性的影响第95页,共160页,星期日,2025年,2月5日pH对酶活性的影响主要有下列几个方面:(1)极强的酸或碱可以使酶的空间结构破坏,引起酶变性;(2)影响酶活性中心催化基团的解离状态,使底物不能分解成产物;(3)影响酶活性中心结合基团的解离状态,使底物不能与它结合;(4)影响底物和辅酶功能基团的解离状态。第96页,共160页,星期日,2025年,2月5日酶催化活性最高时溶液的pH值就称为酶的最适pH。人体内大多数酶的最适pH在6.5~8.0之间。酶的最适pH不是酶的特征性常数。第97页,共160页,星期日,2025年,2月5日六、激活剂对酶促反应速率的影响酶的激活剂(activator)使酶从无活性变为有活性或使酶活性增加的物质必需激活剂(essentialactivator)为酶促反应所必需,如缺乏则测不到酶的活性Mg2+为己糖激酶的必需激活剂非必需激活剂(non-essentialactivator)可以提高酶的催化活性,但不是必需的Cl-对唾液淀粉酶的激活作用第98页,共160页,星期日,2025年,2月5日在酶促反应中,凡能与酶结合而使酶的催化活性下降或消失,但又不引起酶变性的物质称为酶的抑制剂(inhibitor,I)。七、抑制剂对酶活性抑制作用抑制剂可与酶活性中心内或活性中心外的必需基团结合,从而抑制酶的活性。根据抑制剂与酶是否共价结合及抑制效果的不同,将抑制剂对酶的抑制作用分为可逆性抑制剂(reversibleinhibitor)和不可性逆抑制剂(irreversibleinhibitor)。第99页,共160页,星期日,2025年,2月5日抑制剂与酶分子的必需基团共价结合引起酶活性的抑制,且不能采用透析等物理方法使酶活性恢复的抑制作用就是不可逆抑制作用。(一)不可逆抑制作用第100页,共160页,星期日,2025年,2月5日不可逆性抑制作用的抑制剂:基团特异性抑制剂(group-specificinhibitor)底物类似物(substrateanalog)自杀性抑制剂(suicideinhibitor)第101页,共160页,星期日,2025年,2月5日1.基团特异性抑制剂与酶分子中特异的基团共价结合一些酶活性中心的催化基团是丝氨酸残基上的羟基,这些酶称为羟基酶。如胆碱酯酶和丝氨酸蛋白酶有机磷化合物羟基酶失活的酶酸CH3CHN+HONROPROOOE+NROPROOOCHCH3N++EOH解磷定失活的酶有机磷-解磷定复合物活化的酶第102页,共160页,星期日,2025年,2月5日半胱氨酸残基上的巯基是许多酶的必需基团。低浓度的重金属离子(Hg2+、Ag2+、Pb2+等)及As3+等可与巯基酶分子中的巯基结合,使酶失活。第103页,共160页,星期日,2025年,2月5日第104页,共160页,星期日,2025年,2月5日第105页,共160页,星期日,2025年,2月5日2.底物类似物可共价地修饰酶的活性中心与基团特异性抑制剂不同,底物类似物与底物的结构相似,可特异地与酶的活性中心共价结合,不可逆地抑制酶的活性。此类抑制剂可作为亲和标记物,用来定性酶活性中心的功能基团。第106页,共160页,星期日,2025年,2月5日酶的自杀性抑制剂可以作为酶的底物与酶活性中心相结合,生成酶-底物复合物,并接受酶的催化作用。然而,经催化后的中间产物不游离出产物,而是转化为酶的抑制剂,进一步与酶活性中心共价结合,对酶产生抑制作用。E+SES???E·I???E-I3.自杀性抑制剂是经过修饰的酶的底物第107页,共160页,星期日,2025年,2月5日+酶-底物复合物无活性酶中被修饰的FAD?N,N-二甲基丙炔酰胺自杀性抑制剂N,N-二甲基丙炔酰胺在被单胺氧化酶氧化后,由于填加1个质子,使之与酶的辅基FAD结合生成稳定的烷化物,从而酶被抑制
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