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天隆核酸提取仪GeneRotex96SOP

本规程旨在规范天隆核酸提取仪GeneRotex96（以下简称“仪器”）的标准操作流程，确保实验操作人员能够安全、准确、高效地使用该仪器进行核酸提取，保证实验结果的可靠性与重复性，并延长仪器使用寿命。

二、适用范围

本SOP适用于所有经过培训并授权操作天隆GeneRotex96核酸提取仪的实验人员，在进行临床样本、环境样本或其他来源样本的核酸（DNA/RNA）提取时使用。

三、职责

1.操作人员：严格遵守本SOP进行操作，负责仪器的日常使用、清洁与简单维护，及时记录实验数据与仪器运行状况，发现异常情况立即报告并停止使用。

2.仪器管理员：负责仪器的定期维护、校准、故障报修，以及本SOP的更新与培训工作，确保仪器处于良好运行状态。

3.实验室负责人：监督本SOP的执行情况，确保实验室安全与质量控制。

四、操作程序

4.1操作前准备

1.操作人员准备：

*操作人员需穿着合适的实验服，佩戴一次性手套、口罩。若处理潜在生物危害样本，需根据风险等级加强个人防护。

*确保已熟悉仪器操作手册及本SOP内容，经培训合格后方可上岗。

2.环境准备：

*操作应在洁净工作台或生物安全柜内进行，确保操作区域清洁、干燥、无灰尘、无腐蚀性气体。

*检查实验室温度（建议15-30℃）和相对湿度（建议20%-80%）是否在仪器要求范围内。

3.仪器检查：

*开机前检查：检查仪器电源线连接是否牢固，电源插座是否正常。检查仪器外部是否有灰尘、污渍或液体残留，特别是样品区和机械臂运动区域。检查仪器门是否能正常开关。

*开机后检查：打开仪器主电源，待仪器自检完成后（通常会有指示灯或屏幕提示），观察仪器操作界面是否正常显示，各模块（如加热模块、振荡模块、磁分离模块）是否有异常报错。

4.试剂与耗材准备：

*根据实验需求，选择合适的核酸提取试剂盒（如磁珠法），确认试剂盒在有效期内，按照试剂盒说明书的要求储存和准备。

*将所需试剂从冰箱取出，根据需要进行适当平衡至室温（具体参照试剂盒说明）。注意避免反复冻融。

*准备适配的96孔深孔板、磁力套板、吸头、离心管等耗材，并确保其无菌、无核酸酶污染。检查耗材包装是否完好，是否在有效期内。

4.2实验操作步骤

1.试剂准备与加样：

*按照所选核酸提取试剂盒的说明书，在96孔深孔板的指定孔位中依次加入适量的裂解液、蛋白酶K（若有）、待提取的样本等。加样过程应准确、无误，避免样本间交叉污染。

*若需要，在指定孔位加入磁珠混悬液、洗涤液1、洗涤液2、洗脱液等。注意磁珠使用前需充分混匀。

*加样完成后，确保深孔板盖紧，避免液体蒸发或溢出。若试剂盒要求，可进行短暂离心以去除孔内气泡。

2.仪器操作软件设置与运行：

*在仪器配套的电脑上打开GeneRotex96操作软件。

*新建程序或调用标准程序：根据所用试剂盒的类型和实验要求，可以选择调用仪器内置的标准程序模板，或根据试剂盒说明书的推荐参数新建一个提取程序。程序参数通常包括：各步骤（裂解、结合、洗涤1、洗涤2、洗脱等）的温度、时间、振荡速率（若有）、磁分离时间等。

*程序参数确认：仔细核对所选或新建程序的各项参数，确保与试剂盒要求一致。特别注意加热模块的温度设置和磁分离的时间。

*样本板与磁力套板装载：打开仪器样品室门，将准备好的加样深孔板小心放入仪器的指定位置，并确保放置稳妥，定位准确。根据程序要求，将相应的磁力套板（若为分步磁分离）安装到指定位置。

*关闭仪器门，在软件界面上点击“开始运行”或类似按钮启动提取程序。

*运行过程监控：在仪器运行过程中，密切观察仪器运行状态及软件界面显示的进度，如有异常声音、报错信息或液体泄漏，应立即按下仪器上的“停止”按钮或在软件上执行停止操作，并记录异常情况。

3.实验后处理：

*程序运行结束后，仪器会发出提示音，软件界面显示运行完成。

*小心打开仪器门，取出96孔深孔板，重点关注含有洗脱产物的孔位。

*使用移液器将洗脱孔中的核酸产物小心转移至干净的离心管中，做好清晰标记（样本编号、提取日期、操作者等）。

*提取得到的核酸产物应立即进行下游实验（如PCR扩增）或按照要求的条件（通常-20℃或-80℃）保存。

*废弃的深孔板、吸头及其他实验废弃物应按照实验室生物安全规定进行分类处理。

4.3操作后工作

1.仪器清洁与保养：

*用75%乙醇或实验室专用消毒剂擦拭仪器样品室内部、工作台面，去除可能的液体残留和污染物。特别注意清洁磁分离模块和加热模块表面。

*若有液体泄漏到仪器内部，应立即断电并通知仪器管理员进行专