酵母菌培养基优化 (2).pptVIP

第1页，共17页，星期日，2025年，2月5日一、实验目的二、实验原理三、实验器材四、实验步骤五、实验结果第2页，共17页，星期日，2025年，2月5日实验目的1.掌握发酵培养基的配制方法2.熟悉用正交试验优化发酵培养基的方法3.学习比浊法测定发酵液菌浓的方法第3页，共17页，星期日，2025年，2月5日实验原理一、培养基的配制1.确定培养基的基本组成2.确定所用原材料的种类3.确定所用原材料的浓度配比关系第4页，共17页，星期日，2025年，2月5日二、培养基优化原材料种类和浓度配比优化1.单因素法(只是考虑单一变量对结果的影响)2.正交试验法3.均匀试验设计(只考虑试验点在试验范围内均匀散布的一种试验设计方法,试验次数少)第5页，共17页，星期日，2025年，2月5日三、正交试验法1.概念利用已经设计好的表格--正交表--来安排试验并进行数据分析的一种方法。它是从全面试验中挑选出部分有代表性的点进行试验，这些有代表性的点具备了“均匀分散，齐整可比”的特点，是一种高效率、快速、经济的实验设计方法。第6页，共17页，星期日，2025年，2月5日2.基本工具——正交表记号：Ln（tm）L：正交表的符号n：表的行数（可安排试验的次数）t：表中的字码数（水平数）m：表的列数（最多可安排因素个数）L8(27)L9(34)L16(45)第7页，共17页，星期日，2025年，2月5日3.正交表的特点试验点分布均匀、整齐可比任何一列中各字码（水平）都出现，且出现的次数相等任何两列中各横行组成的数字对，包含着所有可能的数字对，且各种数字对出现的次数相等第8页，共17页，星期日，2025年，2月5日四、比浊法测定发酵液菌浓细菌培养物在生长过程中，由于原生质含量的增加，会引起培养物混浊度的增高。细菌悬液的混浊度和透光度成反比、与光密度成正比，透光度或光密度可借助光电比浊计精确测出，因此可用光电比浊计测定细胞悬液的光密度（OD值），表示该菌在特定实验条件下的细菌相对数目，进而反映出其相对生长量。第9页，共17页，星期日，2025年，2月5日实验器材移液管、100ml锥形瓶、光电比浊计、灭菌锅、恒温摇床葡萄糖、蔗糖、酵母提取粉、KH2PO4酵母菌菌液第10页，共17页，星期日，2025年，2月5日实验步骤一、培养基的配制因素水平A葡萄糖/%B蔗糖/%C酵母提取粉/%DKH2PO4/%11.00.00.50.522.01.01.01.033.02.01.51.51.将葡萄糖、蔗糖、酵母提取粉、KH2PO4作为培养基的主要影响因素，每一因素设定3个水平，进行四因素三水平的正交试验，试验设计如下表第11页，共17页，星期日，2025年，2月5日因素A葡萄糖/%B蔗糖/%C酵母提取粉/%DKH2PO4/%OD值实验11(1.0)1(0)1(0.5)1(0.5)实验21(1.0)2(1)2(1)2(1)实验31(1.0)3(2)3(1.5)3(1.5)实验42(2.0)1(0)2(1)3(1.5)实验52(2.0)2(1)3(1.5)1(0.5)实验62(2.0)3(2)1(0.5)2(1)实验73(3.0)1(0)3(1.5)2(1)实验83(3.0)2(1)1(0.5)3(1.5)实验93(3.0)3(2)2(1)1(0.5)2.按下表配制9组培养基于100ml锥形瓶中，每瓶25ml，第12页，共17页，星期日，2025年，2月5日