菌种保藏技术.docxVIP

大家好，今天我们学习的内容是菌种保藏技术。主要内容有1.菌种保藏原理2菌种的保藏方法

菌种保藏原理

菌种是一类重要生物资源，菌种保藏是一项重要的微生物学基础工作。在微生物发酵工业中，获得具有良好性状的生产菌种十分不容易。如何利用优良的微生物菌种保藏技术，使菌种经长期保藏后不但存活，而且保证高产菌株不改变其表型和基因型，特别是不改变初级代谢产物和次级代谢产物的高产能力，即很少发生突变，这对菌种极为重要。

微生物菌种保藏技术很多，保藏的原理基本一致。首先挑选优良纯种，最好是采用它们的休眠体（如分生孢子、芽孢等）；其次要创造一个有利于休眠的环境条件，如采用干燥、低温、缺氧、缺乏营养以及添加保护剂或酸度中和剂等方法，使微生物处于生长代谢不活跃，生长繁殖受到抑制的环境中。

二、菌种的保藏方法

一种良好的保藏方法，首先应能保持原种的优良性状不变，同时还须考虑方法的通用性和简便性。常用的方法有1低温保藏法2.干燥保藏法3.隔绝空气保藏法4.真空冷冻干燥法5.寄主保藏法

1低温保藏法

利用低温对微生物生命活动有抑制作用的原理进行保藏。根据所用温度的高低可以分为两类：普通低温保藏法，即将斜面菌种、固体穿刺培养物或菌悬液等直接放入4-5℃冰箱中保藏，保藏时间一般不超过3个月，到时必须进行移接传代，再放回冰箱。另一类是利用超低温保藏法，用–20℃以下的超低温冰箱或干冰、液氮（–195℃）等进行冻结，保藏效果很好。

2.干燥保藏法

主要是把菌种接到适当载体上，在干燥条件下进行保藏。能够作载体的材料很多，如土壤、细沙、硅胶、滤纸片、麸皮等，这种保藏方法主要适合于细菌的芽孢和霉菌的孢子。细菌芽孢用沙土管保藏，霉菌的孢子多用麸皮管保藏。

3.隔绝空气保藏法

这种方法是利用好气性微生物无氧不生长的原理。向培养好的菌种斜面上，加入灭菌石蜡油，高出斜面1cm，再用固体石蜡密封试管口以隔绝空气，最后放入低温冰箱中保藏，效果很好。如果不用石蜡，可以在斜面菌种长到最好时采用灭菌的橡皮塞代替原有的棉塞，塞紧试管口，放入冰箱或室温下暗处同样可以达到保藏菌种的目的。

4.真空冷冻干燥法

在这类方法中，几乎利用了一切有利于菌种保藏的因素如低温、缺氧、干燥等，因此是目前最好的一类综合性的保藏方法，保藏期长，但操作过程复杂，要求一定的设备条件。其基本过程是：培养菌种，加菌种保护剂（一般食品工业用菌种多用牛乳做保护剂），分装、预冷冻、真空冻干、真空封口。真空冻干的菌种可在常温下长期保藏，也可在低温下保藏。

5.寄主保藏法

是用于一些难以用常规方法保藏的动植物病原菌和病毒。

好了，今天的内容到此结束，谢谢大家。