2.2.2 动物细胞融合技术与单克隆抗体 课件 高二下学期生物人教版选择性必修3.pptxVIP

2.2.2动物细胞融合技术与单克隆抗体本节聚焦:什么是动物细胞融合技术？单克隆抗体是如何制备的？单克隆抗体在临床上有哪些应用？第2节动物细胞工程

植物体细胞杂交技术植物细胞融合植物组织培养温故而知新植物体细胞杂交技术打破不同种植物之间生殖隔离的屏障，实现远缘杂交育种，培育出新的作物类型。有没有技术让不同种动物的体细胞杂交，培育出集不同细胞优势于一身的动物细胞呢？

融合细胞细胞融合37℃40min正在融合的细胞红色荧光染料标记膜蛋白绿色荧光染料标记膜蛋白人细胞小鼠细胞回顾必修一：细胞膜的结构1970年人-鼠细胞融合融合实验

一动物细胞融合技术1.概念：2.结果：3.原理：4.诱导融合的常用方法：指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。细胞膜具有一定的流动性。形成单核的杂交细胞：即融合后形成的杂交细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息。物理法：电融合法化学法：聚乙二醇（PEG）融合法生物法：灭活病毒诱导法是动物细胞融合特有的诱导融合方法5.意义：突破了有性杂交的局限，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。

用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏它们的抗原结构(保留融合活性)。相关信息病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合1.“灭活病毒”中灭活的具体含义是什么？2.灭活病毒诱导细胞融合的原理是什么？细胞核的融合动物细胞融合实质及完成的标志：生物法：灭活病毒诱导法

思考：19世纪30年代，科学家曾在患肺结核、天花和麻疹等疾病的病人的病理组织中观察到多核细胞。如何解释这一现象？病人体内病毒等诱导多个体细胞融合形成了多核细胞。肺结核病人病理切片灭活病毒诱导法

一动物细胞融合技术6.过程：动物细胞融合动物细胞培养AA、AB、BB7.应用：（原理：细胞膜具有流动性）（原理：细胞增殖）(1)动物细胞融合技术已经成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。(2)利用动物细胞融合技术发展起来的杂交瘤技术，为制造单克隆抗体开辟了新途径。

动物细胞融合和植物体细胞杂交比较比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合原理细胞融合前的处理方法诱导细胞融合的方法细胞融合成功的标志结果主要用途意义细胞膜具有一定的流动性、植物细胞的全能性细胞膜具有一定的流动性用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散成单个细胞物理法：电融合法、离心法；化学法：聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+-高pH融合法电融合法、聚乙二醇融合法、灭活病毒诱导法再生出细胞壁细胞核的融合培育植物品种主要用于制造单克隆抗体打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育植物新品种突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能杂种植株杂种细胞【合作探究】

二单克隆抗体及其应用2022年3月16日，“自测版”新冠抗原检测试剂盒正式抵达长沙，在湖南多家药店、医药器械城开售，湖南首批“自测版”新冠抗原检测试剂盒上架。新冠抗原测试剂盒使用方便，个人在家仅需8步即可完成检测。产品可用于口咽拭子、鼻咽拭子取样检测，最快10分钟可出结果。思考：检测试纸中需要的新冠病毒抗体如何制备？

二单克隆抗体及其应用1.常规抗体的制备方法和特点：向动物体内反复注射某种抗原，从动物血清中分离所需抗体产量低、纯度低、特异性差(2)特点：(1)方法:动物体内抗原刺激浆细胞抗体多种B淋巴细胞增殖分化抗原不纯抗体不纯

二单克隆抗体及其应用思考：有什么方法解决常规抗体制备存在产量低、纯度低、特异性差的问题？1个B淋巴细胞B淋巴细胞群大量单一抗体克隆产生**问题：在体外培养条件下，一个B淋巴细胞是不可能无限增殖的！??如何解决这一难题？能在体外大量增殖的骨髓瘤细胞一种B淋巴细胞将二者融合？融合后的细胞就可能大量增殖，产生足够数量的特定抗体1975年英国科学家米尔斯坦和柯勒的实验每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体选择

二单克隆抗体及其应用2.单克隆抗体的制备单克隆抗体的概念:单个细胞无性繁殖化学性质单一，特异性强单：克隆：抗体：由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。1个B淋巴细胞B淋巴细胞群大量单一抗体克隆产生

2.单克隆抗体的制备(1)制备原理:二单克隆抗体及其应用①B淋巴细胞的特点：一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。②骨髓瘤细胞（癌细胞）的特点：能在体外大量增殖③融合后的杂交瘤细胞：既能迅速大量增殖，又能产生抗体一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体骨髓瘤细胞（癌细胞）能在体外大量增殖动物细胞融合杂交瘤细胞动物细胞培养单克隆抗体杂交瘤细胞：既能迅速大量增殖，又能产生抗体由单一B淋巴细胞克