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国家“双高计划”水产养殖技术高水平专业群课程资源

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水质监控技术

《水质监控技术》课程-电子教材

单元（任务）编号

9-2-1

单元（任务）名称

水体亚硝酸盐氮的测定

所属模块（项目）

水体亚硝酸盐氮的监控

关键词

亚硝酸盐氮、测定

学习目标

1.了解亚硝酸盐氮的分光光度法的原理

2.掌握亚硝酸盐氮的分光光度法测定步骤

3.熟知亚硝酸盐氮的分光光度法操作要点

教学内容

知识点

技能点

亚硝酸盐氮的分光光度法的原理

亚硝酸盐氮的分光光度法测定步骤

亚硝酸盐氮的分光光度法操作要点

教学重点

亚硝酸盐氮的分光光度法的原理

亚硝酸盐氮的分光光度法测定步骤

教学难点

亚硝酸盐氮的分光光度法测定步骤

知识讲解

亚硝酸盐对鱼虾的毒性较强，是养殖水域诱发鱼类爆发性疾病的重要因素，养殖过程中水体中亚硝酸盐氮的控制与管理是养殖成功的关键之一。养殖水体中亚硝酸盐一旦超标，将会给养殖户带来巨大经济损失，养殖过程中，水质亚硝酸盐的控制与管理是养殖成功的关键。那么亚硝酸盐氮应该如何检测呢？

下面我们来看一个案例，2017年4月15日上午8点，养殖户孙老板向鱼来鱼旺技术员赖小强求助，近期毛蟹有少量死亡，症状都是脱壳不遂，最近也没有用过任何药品，只是从外面抽入10公分左右水。接到电话后赖小强前往孙老板螃蟹塘，发现池塘水体浑浊，大量螃蟹爬上草，于是技术员马上给其测水质，结果显示pH:8.2，氨氮:无，亚硝酸盐氮:0.8mg/L，得出水质亚硝酸盐氮超标的结论，并给出处理方案。水质中亚硝酸盐氮含量是如何测定的？接下来我们一起来学习。

一、测定原理

水样中的亚硝基在pH=1.8时与溶液中氨基苯磺酰胺重氮化反应生成重氮盐，它再与N-（1-萘基）-乙二胺盐酸盐偶合生成紫红色染料，在540nm波长下测定其吸光度，定量依据是测定的吸光度值与溶液中亚硝酸氮的浓度成正比。

二、测定步骤

准确移取一定体积的水样，置于50毫升比色管中，移取不同体积的亚硝酸钠标准使用液，置于50毫升比色管中，上述溶液分别用用不含亚硝酸盐氮的重蒸水定容至标线，配置成试样溶液和标准系列溶液。试样溶液和标准系列溶液中再加入显色剂，密塞、摇匀、静置，20min，于540nm波长下，用1cm比色皿测定吸光度，绘制标准曲线，并计算得到水样中亚硝酸盐氮的浓度。

上述测定的操作要点是：

1.水样的制备

水样如有颜色和悬浮物，可以每1000mL水样中加入2mL氢氧化铝悬浮液搅拌，静置过滤，弃去25mL初滤液，取50.00mL滤液测定。

如亚硝酸盐含量高，可适量少取水样，用无亚硝酸盐的水稀释至50.00mL。

如水样清澈，则直接取50.00mL。

2.标准系列溶液的制备

在一组六个50ml的比色管中依次吸取亚硝酸盐标准使用液（1.00μg/ml）0ml、1.00ml、3.00ml、5.00ml、7.00ml及10.00ml，至50ml比色管中。用不含亚硝酸盐的二次蒸馏水水稀释至标线。

3.标准系列溶液吸光度值的测定

已定容的标准系列溶液中分别加入1.0ml显色剂，密塞，混匀。静置20min。用1cm比色皿，于波长540nm处，以水为参比，测量吸光度。

4.标准曲线的绘制

以亚硝酸盐氮的当量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。关于标准曲线的绘制方法请大家看一段视频。

5.试样的测定

向试样溶液中加入1.0ml显色剂，密塞，混匀，静置20min。

用1cm比色皿，于波长540nm处，以水为参比，测量吸光度。

根据标准曲线，求得试样溶液中亚硝酸盐氮的当量。上例中，两平行试样溶液的吸光度值分别为0.267和0.269。带入标准曲线线性方程，求得两平行试样中亚硝酸盐氮当量为6.11ug和6.14ug。

6.数据处理

用如下公式计算亚硝酸盐氮的浓度，需要注意的是计算出浓度后取平行双样的算术平均值作为测定结果。

上例中，两平行双样中亚硝酸盐氮当量为6.11ug和6.14ug，取水样体积分别为50.00毫升，计算结果保留三位小数，代入公式得该虾池中水样的亚硝酸盐氮含量为0.122mg/L。

水生动物不同种类、品种及个体对亚硝酸盐的耐受性不同，因而，对不同种类鱼虾蟹的安全密度差异很大。为确保鱼虾蟹的安全（尤其在育苗期），亚硝酸盐含量应控制在0.2㎎/L以下。

结论：本次测定校内2号虾池中水样的亚硝酸盐氮含量为0.122mg/L，水质亚硝酸盐含量达标。