第09章吸光光度法.pptVIP

光栅*第29页，共64页，星期日，2025年，2月5日3.样品室样品室放置各种类型的吸收池（比色皿）和相应的池架附件。吸收池主要有石英池和玻璃池两种。在紫外区须采用石英池，可见区一般用玻璃池。*第30页，共64页，星期日，2025年，2月5日4.检测系统将光强度转换成电流来进行测量。光电检测器。要求：对测定波长范围内的光有快速、灵敏的响应，产生的光电流应与照射于检测器上的光强度成正比。(1)光电管*第31页，共64页，星期日，2025年，2月5日(2)光电二极管阵列电容器再次充电的电量与每个二极管检测到的光子数目成正比，而光子数又与光强成正比。通过测量整个波长范围内光强的变化就可得到吸收光谱。电容器充电电容器放电光照射再次充电测量周期*第32页，共64页，星期日，2025年，2月5日§9.3显色反应与条件的选择9.3.1显色反应的选择1.选择显色反应时，应考虑的因素灵敏度高、选择性高、生成物稳定、显色剂在测定波长处无明显吸收，两种有色物最大吸收波长之差：“对比度”，要求△?60nm。2.配位显色反应当金属离子与有机显色剂形成配合物时，通常会发生电荷转移跃迁，产生很强的紫外—可见吸收光谱*第33页，共64页，星期日，2025年，2月5日3.氧化还原显色反应某些元素的氧化态，如Mn（Ⅶ）、Cr（Ⅵ）在紫外或可见光区能强烈吸收，可利用氧化还原反应对待测离子进行显色后测定。例如：钢中微量锰的测定，2Mn2＋＋5S2O82-＋8H2O=2MnO4＋+10SO42-＋16H+将Mn2＋氧化成紫红色的MnO4＋后，在525nm处进行测定。*第34页，共64页，星期日，2025年，2月5日9.3.2显色剂无机显色剂：硫氰酸盐、钼酸铵等。有机显色剂：种类繁多偶氮类显色剂：性质稳定、显色反应灵敏度高、选择性好、对比度大，应用最广泛。偶氮胂III、PAR等。三苯甲烷类：铬天青S、二甲酚橙等*第35页，共64页，星期日，2025年，2月5日9.3.3显色反应条件的选择1.显色剂用量吸光度A与显色剂用量cR的关系会出现如图所示的几种情况。选择曲线变化平坦处。2.反应体系的酸度在相同实验条件下，分别测定不同pH值条件下显色溶液的吸光度。选择曲线中吸光度较大且恒定的平坦区所对应的pH范围。3.显色时间与温度实验确定4.溶剂*第36页，共64页，星期日，2025年，2月5日5.干扰的消除光度分析中，共存离子如本身有颜色，或与显色剂作用生成有色化合物，都将干扰测定。（1）加入配位掩蔽剂或氧化还原掩蔽剂使干扰离子生成无色配合物或无色离子（2）选择适当的显色条件以避免干扰用磺基水杨酸测定Fe3+离子时,Cu2+与试剂形成黄色络合物,干扰测定，但如控制pH在2.5左右，Cu2+则不与试剂反应。（3）分离干扰离子*第37页，共64页，星期日，2025年，2月5日9.3.3三元配合物在光度分析中

的应用特性简介由一种金属离子同时与两种不同的配位体形成的三元配合物具有下列分析特性：1.稳定，可提高分析测定的准确度和重现性例:Ti-EDTA-H2O2三元配合物的稳定性，比Ti-EDTA和Ti-H2O2二元配合物的稳定性，分别增强约1000倍和100倍。2.比二元配合物具有更高的灵敏度和更大的对比度灵敏度通常可提高1~2倍，有时甚至提高5倍以上。3.比二元体系具有更高的选择性减少了金属离子形成类似配合物的可能性。*第38页，共64页，星期日，2025年，2月5日§9.4吸光度测量条件的选择9.4.1选择适当的入射波长一般应该选择λmax为入射光波长。如果λmax处有共存组分干扰时，则应考虑选择灵敏度稍低但能避免干扰的入射光波长。如图选500nm波长测定，灵敏度虽有所下降，却消除了干扰，提高了测定的准确度和选择性。*第39页，共64页，星期日，2025年，2月5日9.4.2参比溶液的选择为什么需要使用参比溶液？测得的的吸光度真正反映待测溶液吸光强度。选择参比溶液所遵循的一般原则：⑴若仅待测组分与显色剂反应产物在测定波长处有吸收，其他所加试剂均无吸收，用纯溶剂（水)作参比溶液；*第40页，共64页，星期日，2025年，2月5日⑵若显色剂或其他所加试剂在测定波长处略有吸收,而试液