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生物功能化纳米颗粒：革新大肠杆菌O157:H7检测的前沿策略

一、引言

1.1研究背景与意义

在现代社会，食品安全始终是关系到公众健康和社会稳定的重要议题。食源性病原体的污染常常引发大规模的食品安全事件，对人类健康构成严重威胁，同时也给食品行业和社会经济带来巨大损失。大肠杆菌O157:H7作为一种极具代表性的食源性病原体，自被发现以来，已在全球范围内多次引发严重的食品安全事故，成为食品安全领域重点关注的对象。

1982年，美国俄勒冈州和密歇根州因食用受污染的汉堡包，首次爆发了由大肠杆菌O157:H7引起的出血性结肠炎，这一事件拉开了全球对该病原体深入研究的序幕。此后，大肠杆菌O157:H7在世界各地频繁引发感染和暴发流行。1996年，日本发生了大规模的大肠杆菌O157:H7食物中毒事件，涉及多个地区，造成数千人感染，数人死亡，此次事件引起了全球对该病原体危害的高度关注。2011年，德国爆发的肠出血性大肠杆菌疫情，虽然最终查明是由一种名为“Husec41”的变种引起，但也凸显了大肠杆菌相关疫情防控的复杂性和严峻性。

在中国，虽然尚未有大规模暴发流行的报道，但通过监测已陆续在多个省份的市售食品、进口食品、腹泻病患者以及家畜家禽中分离到大肠杆菌O157:H7，这表明其在我国也存在一定的传播风险，潜在威胁不容忽视。

传统的大肠杆菌O157:H7检测方法，如细菌培养法，虽然是检测的“金标准”，但存在检测周期长的问题，通常需要数天时间才能得出结果，这在食品安全应急处理中往往无法满足快速响应的需求。免疫学检测方法，如酶联免疫吸附测定（ELISA），虽然具有一定的灵敏度，但容易出现假阳性或假阴性结果，影响检测的准确性。分子生物学检测方法，如聚合酶链式反应（PCR），对实验条件和操作人员的技术要求较高，且设备昂贵，难以在基层和现场检测中广泛应用。

随着纳米技术的飞速发展，生物功能化纳米颗粒检测技术应运而生，为食源性病原体的检测带来了新的希望。纳米材料由于其独特的尺寸效应、表面效应和量子尺寸效应，展现出优异的光学、电学和磁学性能。将纳米材料进行生物功能化修饰，使其能够特异性地识别和结合目标病原体，从而实现对病原体的高效检测。这种检测技术具有灵敏度高、检测速度快、操作简便等优点，能够在食品安全监测的各个环节，从农田到餐桌，实现对大肠杆菌O157:H7的快速筛查和精准检测，及时发现潜在的食品安全隐患，有效预防食源性疾病的发生，保障公众的饮食安全。同时，该技术对于食品行业的质量控制和监管也具有重要意义，有助于提升整个行业的食品安全水平，促进食品产业的健康发展。

1.2大肠杆菌O157:H7概述

大肠杆菌O157:H7属于肠杆菌科埃希氏菌属，是一种革兰氏染色阴性杆菌。它无芽胞，有鞭毛，在动力试验中呈阳性，但鞭毛抗原有时会丢失，导致动力试验结果为阴性。在生长特性方面，其最适生长温度处于33-42℃之间，在37℃时繁殖速度极快，当温度达到44-45℃时生长状况变差，45.5℃时则停止生长。这种细菌还具有较强的耐酸性，在pH值为2.5-3.0、37℃的环境中能够耐受5小时；并且耐低温，可在冰箱内长期生存，在自然界的水中也能存活数周至数月，但它不耐热，75℃时1分钟即可被灭活，同时对氯敏感，1mg/L的余氯浓度就能将其杀灭。在生化特征上，除了不发酵或迟缓发酵山梨醇这一特性外，其他常见生化特征与大肠埃希氏菌基本相似，不过也存在某些生化反应不完全一致的情况，这些差异具有鉴别意义。例如，大肠杆菌O157:H7虽拥有uidA基因，但其编码的β-葡萄糖醛酸酶不具备活性，无法分解4-甲基伞形酮-β-D-葡萄糖醛酸苷（MUG）产生荧光，即MUG阴性。

大肠杆菌O157:H7的致病机制较为复杂，主要致病因子是其产生的大量Vero毒素（VT），也被称作类志贺氏毒素（SLT）。Vero毒素由一个A亚单位和5-6个B亚单位组成。其中，B亚单位能够与宿主肠壁细胞糖脂受体紧密结合，使得具有毒素活性的A亚单位得以进入细胞内部。A亚单位进入细胞后，会改变60s核糖体的组分，进而干扰蛋白质的合成过程，最终导致细胞受损。此外，紧密黏附素介导细菌定植于肠道上皮细胞，Ⅲ型分泌系统向宿主细胞注射效应蛋白，干扰细胞功能，共同促进了细菌的致病性。

该病菌的传播途径主要是食源性传播，食用被污染的肉类（特别是未煮熟的牛肉，如汉堡肉）、牛奶、蔬菜、水果等都有可能感染。水源污染也是重要的传播途径之一，被动物粪便污染的饮用水可造成暴发流行，井水、溪水等未经处理的水源风险较高，游泳池若消毒不彻底也可能成为传播媒介。接触传播同样不可忽视，农场动物如牛、羊的