硫酸铵沉淀实验记录表.docxVIP

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硫酸铵沉淀实验记录表

一、实验基础信息栏

样品名称

样品来源

实验日期

目标物质

实验温度

溶液pH值

操作人

年月日

□0℃□4℃□室温□其他:

样品预处理

1.离心条件:______rpm×______min

2.上清液体积:______mL

3.初始饱和度:______%

4.缓冲液类型:________________

二、分级沉淀操作记录表

沉淀阶段

目标饱和度(%)

初始饱和度(%)

样品体积(mL)

硫酸铵添加量

搅拌时间

离心条件

沉淀状态

上清液处理

□固体:______g饱和液:______mL

rpm×min

□浑浊□絮状□颗粒□无沉淀

□弃去□继续盐析□保存

□固体:______g□饱和液:______mL

rpm×min

□浑浊□絮状□颗粒□无沉淀

□弃去□继续盐析□保存

□固体:______g□饱和液:______mL

rpm×min

□浑浊□絮状□颗粒□无沉淀

□弃去□继续盐析□保存

□固体:______g□饱和液:______mL

rpm×min

□浑浊□絮状□颗粒□无沉淀

□弃去□继续盐析□保存

□固体:______g:______mL

rpm×min

□浑浊□絮状□颗粒□无沉淀

□弃去□继续盐析□保存

三、沉淀后处理及分析表

沉淀编号

对应饱和度区间(%)

溶解缓冲液

溶解体积(mL)

透析条件

总蛋白量(mg)

目标活性(U)

比活性(U/mg)

收率(%)

1

缓冲液:时间:h

2

缓冲液:时间:h

3

缓冲液::h

4

缓冲液:____________h

5

缓冲液:时间:h

四、关键计算与操作规范

硫酸铵添加量计算

固体添加(室温):参考表2-1,根据初始与目标饱和度查表获取每升添加量,按实际体积换算。

饱和液添加:公式:V=V?×(S?-S?)/(1-S?)(V:饱和液体积;V?:原溶液体积;S?/S?:初始/目标饱和度)。

操作核心准则

盐添加:缓慢分批加入,轻柔搅拌避免起泡(防止蛋白变性);

温度控制:全程低温操作(0-4℃),减少蛋白降解;

离心时机:加盐后搅拌5-30min待沉淀稳定后离心;

饱和液配制:767g硫酸铵溶于1L水,调pH至7.0,50-60℃溶解后平衡。

五、实验总结与备注

目标物质最佳沉淀区间:%-%饱和度

主要杂质沉淀区间:%-%饱和度

异常情况记录:________________________(如沉淀量异常、活性丢失等)

后续纯化建议:□离子交换□凝胶过滤□亲和层析□其他:________

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