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工业微生物育种第1页，共14页，星期日，2025年，2月5日1.1诱发突变1.1.1辐射与诱变（1）辐射：上下左右四面八方传递能量的过程？电离辐射：X射线、α射线、β射线、γ射线、等离子、中子和质子等非电离辐射：紫外线?和?射线的穿透力很弱，故只能用“内照射”。实际应用时，一般不用?射线，只用?射线。?射线常用辐射源是P32和S35，尤以P32使用较多（2）电离辐射诱变途径：物理作用→化学作用→生物学作用。第2页，共14页，星期日，2025年，2月5日（3）辐射剂量及表示方法定义：单位质量被照射的物质所吸收的能量数值，称为辐射剂量。?射线和r射线：用“伦琴”（r）表示，即在1克空气中吸收83尔格（erg）辐射的能量。中子：单位是“积分流量”。即每平方厘米的截面上通过的中子数（n/cm2）。?射线：用“微居里”表示。具体是每克物质吸收多少“微居里”（?cu）的放射性同位素。微居里是放射强度单位，表示每秒钟有3-7×104个原子核发生蜕度。第3页，共14页，星期日，2025年，2月5日（4）电离辐射致变的机理照射→原发电离→次级电离→基因分子结构改组→基因突变基因突变的频率与辐射剂量成正比，即剂量增加一倍，突变频率增加一倍，但突变率不受辐射强度的影响。辐射强度是指单位时间内照射的剂量数，即剂量率，倘若照射剂量不变，不管单位时间内所照射是多还是少，基因突变率总是保持一致。第4页，共14页，星期日，2025年，2月5日2.1突变的分子机理2.1.1点突变1、点突变概念：单碱基对置换，也称点突变。置换方式：转换：同一类碱基间的置换，如嘧啶被嘧啶置换；颠换：不同类碱基间的置换，如嘧啶被嘌呤置换。第5页，共14页，星期日，2025年，2月5日2、碱基置换的内源机制（1）5-甲基胞嘧啶（5mC)的脱氨作用:人类基因组中70%~90%的5mC发生在CpG二核苷酸中，而15%的CpG发生5mG；这些甲基化的CpG一般是分散存在的，“CpG”岛则一般为非甲基化的。第6页，共14页，星期日，2025年，2月5日（2）DNA复制过程中出现差错：复制过程中碱基错配不能被错误修复系统有效地校正，就会导致碱基对置换突变。第7页，共14页，星期日，2025年，2月5日（3）滑移错配：模板链上的碱基滑动脱出配对位置，使引物与模板链发生过渡性错排，最后在复制时导致碱基的错误掺入。滑移错配在模板上同一碱基连续排列时更易发生。第8页，共14页，星期日，2025年，2月5日（4）脱氨基效应：亚硝酸可使腺嘌呤（A）脱去氨基成为次黄嘌呤（H）使胞嘧啶（C）脱去氨基成为尿嘧啶（U），使鸟嘌呤（G）脱去氨基成为黄嘌呤（I）。前两个变化均导致碱基错配：第9页，共14页，星期日，2025年，2月5日（5）脱嘌呤效应：一些化学物质（包括酶）可引起脱嘌呤作用，如果不能有效的修复，由于模板链上没有碱基，DNA聚合酶会错误地掺入碱基，则会导致碱基置换。腺嘌呤是最容易掺入的碱基。（6）氧化性损伤碱基：氧自由基（如过氧化氢、羟基等）的氧化作用DNA，其主要产物是8—羟鸟嘌呤，它可引起G→T或A→C的颠换。（7）紫外线损伤：紫外线可引起G→A和C→T的置换。另外紫外线还可以引起嘧啶二聚体的形成而改变DNA的空间结构。第10页，共14页，星期日，2025年，2月5日