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生物分离纯化习题试卷及答案

考试时间：______分钟总分：______分姓名：______

一、选择题

1.在生物分离纯化过程中，选择合适的方法首要依据是：

A.分离操作的简便性

B.实验室设备的昂贵程度

C.目标分子的物理化学性质与待分离组分的差异

D.所选方法在相关领域的应用频率

2.下列哪种层析技术主要依据分子大小进行分离？

A.离子交换层析

B.亲和层析

C.凝胶过滤层析

D.反相层析

3.在离子交换层析中，要使带负电荷的蛋白质被吸附到阳离子交换树脂上，树脂的基团应具有：

A.强酸性

B.中性

C.弱酸性

D.强碱性

4.下列操作中，不属于蛋白质纯化基本流程的是：

A.样品溶解与澄清

B.使用有机溶剂进行沉淀

C.通过凝胶过滤层析除去杂质

D.纯化蛋白的活性测定

5.分辨率（R.S）的定义是：

A.目标产物在层析过程中移动的距离

B.两个相邻组分在层析过程中分离的程度的量度

C.分离纯化过程中目标产物的回收百分比

D.分离操作所需的最低压力

6.下列哪项不是影响蛋白质溶解度的因素？

A.蛋白质的分子量

B.溶液的pH值

C.溶剂类型

D.蛋白质的一级结构

7.在亲和层析中，选择固定相的依据主要是：

A.固定相材料的机械强度

B.固定相与目标分子之间的高度特异性相互作用

C.固定相的成本低廉

D.固定相的化学惰性

8.在蛋白质纯化过程中，为了保持蛋白质的天然活性，通常需要：

A.使用高浓度的去污剂

B.避免高温和极端pH环境

C.经常更换缓冲液

D.使用强酸或强碱进行洗涤

9.离心分离主要利用物质的什么差异进行操作？

A.溶解度

B.电荷

C.密度

D.分子形状

10.下列哪种方法通常用于测定蛋白质的纯度？

A.紫外分光光度法测定浓度

B.考马斯亮蓝G-250染色法

C.离心沉降法

D.毛细管电泳法

二、填空题

1.生物分离纯化技术的核心目标是______________和______________。

2.凝胶过滤层析中，分子量较大的蛋白质在柱中停留时间__________，洗脱顺序__________。

3.离子交换层析中，通常采用__________梯度来洗脱蛋白质。

4.亲和层析利用了分子间______________的特异性相互作用。

5.分离纯化过程中，衡量目标产物得到多少的指标是______________。

6.分离纯化过程中，衡量目标产物纯化程度的指标是______________。

7.蛋白质变性是指蛋白质______________或______________发生改变，导致其生物活性丧失的过程。

8.选择合适的缓冲液时，需要考虑其______________、______________和______________。

9.蛋白质复性是指变性蛋白质在特定条件下，其______________和______________恢复的过程。

10.影响层析分离效果的关键因素之一是______________的选择。

三、名词解释

1.分辨率(Resolution)

2.回收率(Recovery)

3.凝胶过滤层析(GelFiltrationChromatography/SizeExclusionChromatography)

4.亲和层析(AffinityChromatography)

5.纯度(Purity)

四、简答题

1.简述离子交换层析的基本原理及其在蛋白质纯化中的应用。

2.比较凝胶过滤层析和离子交换层析在原理、应用和操作方面的主要区别。

3.在蛋白质纯化过程中，为什么要进行缓冲液交换？简述常见的缓冲液交换方法及其原理。

4.影响蛋白质在层析柱上吸附的因素有哪些？如何通过调整这些因素来优化分离效果？

5.简述蛋白质变性与复性的区别，并说明在蛋白质纯化过程中如何避免蛋白质变性。

五、论述题

1.设计一个简化的蛋白质纯化方案，用于从含有多种杂蛋白的粗提物中初步分离纯化一种特定大小的蛋白质。请说明选择分离方法的依据，并简述主要步骤和需要控制的条件。

2.讨论生物分离纯化过程中，提高分辨率和提高回收率之间可能存在的矛盾，以及在实际操作中如