血细胞化学染色.pptVIP

第三章

血细胞化学染色;一、概述

（一）研究对象

外周血和骨髓新鲜涂片单个细胞中的化学物质：

酶类、脂类、糖类、铁、蛋白质、核酸等

;

（二）临床应用;

二、常用细胞化学染色方法

;过氧化物酶染色

（peroxidase,POX）

;POX;

2.单核细胞系统阴性或弱阳性

3.淋巴细胞系统

红细胞系统

巨核细胞系统阴性

浆细胞

组织细胞

;;【临床评价】;1.急性髓细胞白血病

（1）急性粒细胞白血病

阳性反应

（2）急性单核细胞白血病

弱阳性反应

;2.急性淋巴细胞白血病

阴性反应或阳性率3%(残留原粒细胞)

;中性粒细胞碱性磷酸酶染色

（neutrophilicalkaline

phosphatase，NAP）;磷酸萘酚钠

（基质中）;【结果判断】

胞浆中有紫黑色颗粒为阳性(+~++++）

;【正常血细胞染色反应】;;

2.NAP积分值

计数100个成熟中性粒细胞（杆状和分叶）,分别记录其分级情况：

;(-)0分

(+)1分

(++)2分

(+++)3分

(++++)4分

阳性率全部阳性反应细胞之和

积分值各种阳性程度细胞的分值之和

;3.参考值

积分值35-70分

(各实验室参考值不同)

;

【临床评价】

（1）细菌性感染与病毒性感染

（尤其是化脓性感染）

明显增加无明显变化

;(2）类白血病反应与慢性粒细胞白血病

明显增加明显下降且常为零分，

缓解时又上升到正常

;过碘酸-雪夫反应

(糖原染色)

（periodicacid-Schiffreaction，PAS）;双醛基;【结果判断】;【正常血细胞染色反应】;2.红细胞系统

阴性

3.单核细胞系统

绝大多数阳性呈细颗粒，有时分布于细胞边缘的阳性颗粒较粗大。

;

4.淋巴细胞系统

大多数淋巴细胞呈阴性；

少于20%淋巴细胞呈粗颗粒状或块状阳性。

5.巨核细胞系统

呈颗粒状或块状阳性（含血小板）。

;【临床评价】;;3.鉴别急性白血病类型;（2）急性粒细胞白血病

少数阳性，呈细颗粒状或均匀红色。

（3）急性单核细胞白血病

可阳性，呈细颗粒状、弥散分布，有时

胞质边缘处颗粒较粗大。;α-醋酸萘酚酯酶染色

（α-naphtholacetateesterase，α-NAE）;α-醋酸萘酚酯酶

（细胞内）;【结果判断】

胞浆内有灰黑色或棕黑色弥散性颗粒状沉淀为阳性。;

氟化钠抑制试验

在基质液中加入适量NaF,其余染色方法同上。

两种方法染色后用油镜计数100或200个被检细胞，分别计算出抑制前和抑制后的阳性率或阳性积分。;;【正常血细胞染色反应】;2.粒细胞系统

原粒细胞阴性或弱阳性

以下阶段为弱阳性

3.淋巴细胞系统

多数阴性，少数弱阳性

;;【临床评价】;铁染色

（ferricstain）;亚铁氰化钾;

【结果判断】

幼红细胞核染色为鲜红色,铁粒呈蓝绿色。

;

细胞外铁

低倍镜观察涂片尾部和骨髓小粒,细

胞外铁位于幼红细胞外或骨髓小粒巨噬

细胞浆内，呈蓝色颗粒状、小珠状或团

块状。

;

再用油镜判断阳性程度，根据铁量

多少分五级:

（-）

（+）

（++）

（+++）

（++++）;;细胞内铁

存在于中幼红细胞、晚幼红细胞及成熟红细胞中的铁。

油镜下计数100个中幼红细胞和晚幼红细胞，记录胞浆中含有蓝色颗粒细胞的百分率。

;

根据细胞内铁颗粒的数目、大小、染色深浅和颗粒分布情况,将铁粒幼红细胞分为四型:

Ⅰ型

Ⅱ型

Ⅲ型

Ⅳ型;细胞内铁;;1.细胞外铁

+～++，约2/3人为++，约1/3人