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第17章荧光免疫技

术

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目录

CONTENTS

01.02.03.

技术基础理论主要技术类型实验操作流程

04.05.06.

核心设备与材临床应用领域质量控制要点

料

01技术基础理论

荧光标记原理

荧光现象荧光标记

0荧光物质在特定波长光02将荧光物质与抗体等生

1激发下发出可见光。物分子结合，形成荧光

标记物。

荧光检测标记方法

03利用荧光显微镜或荧光04包括直接标记和间接标

分光光度计等设备检测记两种。

荧光标记物。

免疫反应机制

抗原-抗体反应抗原表位抗体结构免疫反应类型

荧光免疫技术基于抗原与抗抗原表面能被抗体识别的特抗体由可变区和恒定区组成，包括特异性结合、竞争结合

体的特异性结合。定化学基团或结构。可变区决定抗体特异性。和夹心法等。

技术发展历程

早期发展技术进步

荧光免疫技术起源于20世纪40年代，随着荧光染料、标记技术和检测设备的

最初主要用于实验室内抗原和抗体的检不断发展，荧光免疫技术的灵敏度、特

测。异性和应用范围不断提高。

自动化与高通量应用领域

现代荧光免疫技术逐渐向自动化和高通广泛应用于生物医学、临床诊断、药物

量方向发展，可同时检测多种抗原或抗筛选和环境监测等领域。

体。

02主要技术类型

直接荧光抗体法

原理

直接荧光抗体法（DFA）是将荧光素标记的特异性抗体直接与充分暴露的受检标本中的抗原结合，形成抗原-抗体复合物，在荧

光显微镜下观察，以判断受检标本中是否含有目标抗原。

优点

DFA操作简便、快捷，能迅速提供结果，且特异性高。

缺点

DFA的敏感性相对较低，容易出现假阴性结果，且无法检测抗原的抗体。

应用

DFA主要用于检测某些病毒、细菌、真菌等微生物感染，如流感病毒、呼吸道合胞病毒、链球菌等。

间接荧光免疫法

0102

原理优点

敏感性高，可检测多种抗原，且可以进行定量分析。

间接荧光免疫法（IFA）是将特异性抗体（第一抗体）与受IFA

检标本中的