文冠果XsWRI1基因克隆、转录活性及组织特异性表达分析.pdfVIP

第４９卷第２期南京林业大学学报（自然科学版）Ｖｏｌ．４９，Ｎｏ．２

２０２５年３月ＪｏｕｒｎａｌｏｆＮａｎｊｉｎｇＦｏｒｅｓｔｒｙＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（ＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓＥｄｉｔｉｏｎ）Ｍａｒ．，２０２５

文冠果ＸｓＷＲＩ１基因克隆、转录活性及

组织特异性表达分析

张薇，李麟坤，梁重钧，王利兵∗

（中国林业科学研究院林业研究所，林木遗传育种全国重点实验室，北京１０００９１）

摘要：【目的】表征文冠果（Ｘａｎｔｈｏｃｅｒａｓｓｏｒｂｉｆｏｌｉｕｍ）中ＷＲＩＮＫＬＥＤ１（ＷＲＩ１）转录因子的序列同一性、转录激活活性

和功能域，为探究其在种子油生物合成中的调控作用提供参考。【方法】利用ｃＤＮＡ末端快速扩增（ＲＡＣＥ）技术

从成熟文冠果胚乳组织中克隆ＸｓＷＲＩ１全长ｃＤＮＡ序列，利用生物信息学工具分析蛋白质序列特性。构建ｐＧ⁃

ＢＫＴ７⁃ＸｓＷＲＩ１载体，并将其转化到Ｙ２ＨＧｏｌｄ酵母感受态验证转录激活活性。通过实时荧光定量ＰＣＲ技术

（ｑＲＴ⁃ＰＣＲ）对根、茎、叶、花瓣、雄蕊和发育中的种仁组织特异性表达模式进行定量分析。【结果】ＸｓＷＲＩ１基因

（ＧｅｎＢａｎｋ登录号：ＯＲ５００２８７）全长１６８８ｂｐ，编码４１４个氨基酸，为亲水性不稳定蛋白。酵母活性检测证实

ＸｓＷＲＩ１具有较强的转录激活活性。组织特异性表达分析显示，ＸｓＷＲＩ１的表达在发育胚乳中占主导地位，营养

器官（根、茎、叶）和其他生殖器官（花瓣、雄蕊）中的表达水平可以忽略不计。结构预测确定了２个保守的ＡＰ２／

ＥＲＥＢＰＤＮＡ结合结构域（残基７６⁃１４８和１７７⁃２３８）和一个核定位信号。【结论】本研究阐明ＸｓＷＲＩ１在文冠果中

的分子特征和组织特异性调控作用，突出了其在脂质生物合成途径中的潜在作用。这些发现为有针对性的基因

操作，以增强木本油料作物的种子油积累奠定了基础。

关键词：文冠果；ＸｓＷＲＩ１；基因克隆；转录激活；组织特异性表达；种子油生物合成

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中图分类号：Ｓ７２７．３２文献标志码：Ａ文章编号：１０００２００６（２０２５）０２００２３０８

Ｃｌｏｎｉｎｇ，ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌａｃｔｉｖａｔｉｏｎ，ａｎｄｔｉｓｓｕｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎａｌｙｓｉｓｏｆ

ＸｓＷＲＩ１ｆｒｏｍＸａｎｔｈｏｃｅｒａｓｓｏｒｂｉｆｏｌｉｕｍ

ＺＨＡＮＧＷｅｉ，ＬＩＬｉｎｋｕｎ，ＬＩＡＮＧＣｈｏｎｇｊｕｎ，ＷＡＮＧＬｉｂｉｎｇ∗

（ＳｔａｔｅＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＴｒｅｅＧｅｎｅｔｉｃｓａｎｄＢｒｅｅｄｉｎｇ，ＲｅｓｅａｒｃｈＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＦｏｒｅｓｔｒｙ，

ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＦｏｒｅｓｔｒｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００９１，Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ：【Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ】Ｔｈｉｓｓｔｕｄｙａｉｍｅｄｔｏｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｅｔｈｅｓｅｑｕｅｎｃｅｉｄｅｎｔｉｔｙ，ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌａｃｔｉｖａｔｉｏｎｐｏｔｅｎｔｉａｌ，ａｎｄ

ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｄｏｍａｉｎｓｏｆｔｈｅＷＲＩＮＫＬＥＤ１（ＷＲＩ１）ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎｆａｃｔｏｒｉｎＸａｎｔｈｏｃｅｒａｓｓｏｒｂｉｆｏｌｉｕｍ（ｙｅｌｌｏｗｈｏｒｎ），ｐｒｏｖｉｄｉｎｇ

ｉｎｓｉｇｈｔｓｉｎｔｏｉｔｓｒｅｇ