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大题06生物技术实践(一)
1.高温淀粉酶在大规模工业生产中有很强的实用性。研究者欲从热菜中筛选产生高温淀粉酶的嗜热菌,筛选流程如下图。实验中所用的1号培养基组分为水、无机盐、NH4NO2和X,Ⅱ号培养基组分为水、无机盐、NH4NO3、X和Y。
回答下列问题:
(1)产生高温淀粉酶的嗜热菌能从热泉中被筛选出来的原因是___________。
(2)培养基中的Y物质是___________,I、Ⅱ号培养基均属于__________培养基。
(3)I号培养基接种后需放在摇床重振荡培养,其目的是__________,在Ⅱ号培养基上接种完成后将培养基放在恒温培养箱中,调整温度为____________(填“30℃”“50℃”或“80℃”)。若培养基上长出的菌落形状、大小、隆起程度和颜色等不同,说明样品中含有多种产生高温淀粉酶的嗜热菌,判断依据是_______________。
(4)若要测定嗜热样品中能产生高温淀粉酶的菌体数量,请写出主要实验步骤:____________________。
2.为筛选出优良的纤维素酶产生菌,某科研团队从腐木、腐土、腐叶等样品中采集微生物,配置马铃薯琼脂培养基和羧甲基纤维素琼脂培养基(后者的配方如下表),分别用于初筛和复筛,最终分离、纯化得到降解纤维素能力较强的木霉株(T-1)和青霉株(P-1,P-2)。回答下列问题:
物质
质量或体积
物质
质量或体积
羧甲基纤维素钠
10g
琼脂
20g
(NH4)2SO4
4g
蒸馏水
1000mL
KH2PO4
2g
MgSO4·7H2O
0.5g
(1)表中的培养基为___________(填“固体”或“液体”)培养基,为微生物提供碳源的物质是___________。从功能上分析,该培养基属于___________培养基。
(2)筛选产纤维素酶的微生物时,常用的染料是___________,最终选择___________的菌落挑取菌种,进一步纯化。
(3)β-葡萄糖苷酶是一种纤维素酶,能将纤维二糖分解为___________。为了探究T-1、P-1、P-2这3株霉菌产生β-葡萄糖苷酶的活性选用甘蔗渣作为碳源的发酵产酶培养基,以水杨素(一种纤维二糖)作为酶促反应底物,写出简要实验思路:_____________________________。
3.提取植物有效成分时,不同的有机物具有不同的理化特性,所采用的提取方法也不同。分析下列关于提取植物有效成分的实验,回答相关问题:
(1)柠檬精油是生产食品和药品的常用原料,柠檬花中含有精油A,柠檬皮中精油B含量较高。两者都难溶于水,且具有挥发性,精油A的热稳定性比精油B高,根据两者的特性,提取精油A可以选择与玫瑰精油一样的提取方式,常采用的方法是____________,提取原理是____________,形成油水混合物,冷却后,混合物又重新分出油层和水层。此方法不适用于精油B的提取,原因是________________________。
(2)柠檬精油A和精油B易溶于有机溶剂,如果要高效提取食品级精油B,最好选择______(填“萃取法”或“压榨法”),原因是______________________________。
(3)工业生产上,提取天然β-胡萝卜素的方法主要有三种,一种是从植物中获取,二是____________,三是利用微生物的发酵生产。按照“胡萝卜→粉碎→干燥→萃取→过滤→浓缩→胡萝卜素”流程______(填“能”或“不能”)得到纯净的β-胡萝卜素,理由是____________(不考虑杂质)。
4.产脂肪酶细菌可用于含油废水处理。研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到产酶能力较高的菌株。
请回答下列问题:
(1)将①泥样品稀释液接种至以脂肪为唯一_________(选填“氮源”、“碳源”)的甲培养基中进行培养,培养一段时间后,稀释涂布于乙培养基上。甲、乙培养基从功能上分类属于_________培养基。
(2)配制的培养基必须进行灭菌处理,目的是_________。检测固体培养基灭菌效果的常用方法是________。
(3)在步骤⑤的筛选过程中,如果要测定产脂肪酶细菌的活菌数,请简要写出实验思路___________。
(4)对筛选出的目的菌株可通过射线照射处理以提高其产酶能力,该过程的原理是射线照射可引起细菌___________。
(5)用筛选出的目的菌株用于含油废水处理时,可采用_________技术,使菌株被反复利用,以降低生产成本。
5.某研究团队拟从餐厨垃圾中分离具有高效降解能力的微生物,并制成菌制剂,用于餐厨垃圾高效无害化处理。设计实验如下:
步骤一:取一定量的餐厨垃圾样品,筛除大块杂质后,装入无菌袋中密封,备用。
步骤二:配制用于培养菌种的培养基,配方如下:
成分
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