实验室环境和人体表面微生物的检查分离专家讲座.pptxVIP

目标要求;原理;操作步骤;思索题;试验汇报;试验4显微镜使用及细菌简单染色法;;;;;;;;油镜使用;;;三、试验材料;;;;;;注意事项;问题和思索;五、试验汇报;试验4革兰氏染色法

荚膜染色;一、试验目标

;二、原理;;;;;;;;三、试验材料;四、试验步骤;;;;;;;;;;;;注意事项;思索题;五、试验内容及结果;荚膜染色;试验步骤;;;注意事项;思索题;试验内容及结果;;试验5细菌芽孢和鞭毛染色;一、试验目标

;细菌芽孢染色;

芽孢是菌种分类判定主要指标，在菌落形态上也有其相关特征。形成芽孢细菌菌落表面普通为粗糙不透明，常展现褶皱;有些细菌（多为杆菌）在一定条件下，细胞质高度浓缩脱水所形成一个抗逆性很强圆形、椭圆形或圆柱形休眠体。

1个细菌细胞只形成1个芽孢，有在中部，有在偏端，有在顶端。

在有些细菌中，芽孢直径小于菌体直径，这些细菌称为芽孢杆菌，为好氧细菌；在另一些细菌中，芽孢直径大于菌体直径，使整个菌体呈梭形或鼓塑形，这些细菌称为梭状芽孢杆菌。

产芽孢细菌多为杆菌，在球菌和螺菌中，只有少数种类有芽孢，球菌中只有芽孢八叠菌（Sporosarcina）属产芽孢。弧菌中只有芽孢弧菌属(Sporovibrio)产芽孢。;芽孢形成过程

;芽孢结构;2染色原理;处理方法：普通采取碱性染料并在微火上加热，或延长染色时间，使菌体和芽孢都同时染上色后，再用脱色剂冲洗，脱去菌体颜色，但仍保留芽孢颜色。并用另一个对比鲜明染料使菌体着色（复染），如此能够在显微镜下显著区分芽孢和营养体形态。

通常，芽孢染色采取弱碱性染料孔雀绿在加热条件下进行。染色完成，用蒸馏水冲洗。因孔雀绿是弱碱性染料，与菌体结协力较差，所以易被水冲洗掉，而进入芽孢孔雀绿却难于溶出。水洗后，再用一个呈红色碱性染料复染，使菌体和芽孢展现不一样颜色。

;3实验材料;4染色步骤;;;枯草杆菌石炭酸复红

染色图片;5注意事项;思索题;6试验汇报;;1背景知识;鞭毛是细菌运动“器官”，细菌是否含有鞭毛以及鞭毛着生位置是细菌一项主要形态特征。

大多数球菌无鞭毛，有些杆菌生有鞭毛，螺旋菌都生有鞭毛。

幼龄菌运动活泼，老龄菌运动性差或失去鞭??不能运动。（水制片观察---泳动或旋转，减弱光照强度）;;;2染色原理;3实验材料;4实验内容;细菌运动性观察（选做）;鞭毛染色;;;5注意事项;;6思索题;7试验汇报;;;试验八酵母菌形态观察、大小测定和计数;;背景知识;一试验目标;背景知识;;;;;;;二染色原理;三、试验材料：;;;注意事项;五、试验结果;微生物细胞大小的测定;

一.试验目标;二..试验原理

;目镜测微尺是一块圆形玻片，在玻片中央把5mm长度刻成50等分，或把10mm长度刻成100等分。测量时，将其放在接目镜中隔板上(此处恰好与物镜放大中间像重合)来测量经显微镜放大后细胞物象。因为在显微镜不一样接目镜和接物镜系统下，放大倍数不一样，目镜测微尺每格所表示长度随显微镜放大倍数而改变。所以在使用前，须用镜台测微尺来校正目镜测微尺。

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镜台测微尺形如载玻片，在中央圆形盖片下，有一长为1mm刻度，准确等分为100格，每格长10μm。故用已知长度台尺校正目尺，即可求出目尺一格长度。;三..试验器材

;四试验步骤;1.将目镜测微尺装入目镜内，刻度朝下，并将镜台测微尺置载物台上。

2.用低倍镜观察到镜台测微尺刻度。

3.换用高倍镜测量，先用镜台测微尺标定。计算出目镜测微尺每格长度。移动镜台测微尺和转动目镜测微尺，使二者刻度平行，并使两尺第一条线重合。向右寻找另外相重合直线，统计两重合刻度间目镜测微尺和镜台测微尺格数，由公式算出目镜测微尺每格长度。;;五.试验汇报

;注意事项;试验完成注意事项;作业点平（芽孢、鞭毛染色）;画图要求;;;二、基本原理-计数;;;;三、材料与器材;四、操作步骤;;;注意事项:

;;;五、思索题

;六、试验汇报;试验9水细菌学检验

1.水中细菌总数测定;一、目标要求;背景知识;;二、基本原理;三、试验材料;四试验步骤（稀释涂布平板法）

;（2）池水、河水或湖水等;;;五、菌落计数及汇报方法p208;;;思索题;;;;;试验10滤膜法测定水中总大肠菌群;背景知识;大肠菌群=大肠杆菌吗？;大肠菌群卫生意义;大肠菌群检验比较简单，但其和粪便污染相关性还受到质疑，原因是其中一些细菌能够在环境样品中检出。

??相对来说，粪大肠菌群对粪便污染指示作用更为直接和贴切，而且检测方法相对大肠杆菌简单，为此是一个很好粪便指示菌（或称为“指示菌群”）。与大肠菌群相比，粪大肠菌群在人和动物粪便中所占百分比较大，而且在自然界轻易死亡。所以，粪大肠菌群存在表明食品可能直接或