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2025年大学化学生物学(分子生物学实验)试题及答案
(考试时间:90分钟满分100分)
班级______姓名______
一、选择题(总共10题,每题3分,每题只有一个正确答案,请将正确答案填入括号内)
1.在分子生物学实验中,用于提取DNA的常用试剂是()
A.乙醇B.氯仿C.酚D.SDS
2.以下哪种技术可用于检测特定基因的表达水平()
A.PCRB.WesternblotC.NorthernblotD.Southernblot
3.限制性内切酶切割DNA的位点通常是()
A.随机的B.特定的核苷酸序列C.富含AT的区域D.富含GC的区域
4.构建基因表达载体时,常用的启动子是()
A.真核生物启动子B.原核生物启动子C.病毒启动子D.人工合成启动子
5.用于蛋白质纯化的亲和层析技术,其原理是利用蛋白质与()的特异性结合
A.配体B.抗体C.金属离子D.分子筛
6.在PCR反应中,TaqDNA聚合酶的作用是()
A.解开DNA双链B.合成引物C.延伸DNA链D.识别模板
7.以下哪种方法可用于检测蛋白质与DNA的相互作用()
A.EMSAB.GSTpull-downC.Co-IPD.酵母双杂交
8.基因克隆中,常用的载体不包括()
A.质粒B.噬菌体C.病毒D.染色体
9.实时荧光定量PCR技术可用于()
A.基因定量分析B.基因突变检测C.基因表达谱分析D.以上都是
10.蛋白质印迹法中,将蛋白质从凝胶转移到膜上的方法是()
A.电泳B.透析C.虹吸D.电转印
二、多项选择题(总共5题,每题5分,每题有两个或两个以上正确答案,请将正确答案填入括号内)
1.分子生物学实验中常用的缓冲液有()
A.Tris-HCl缓冲液B.PBS缓冲液C.醋酸缓冲液D.柠檬酸盐缓冲液
2.基因工程操作中,常用的工具酶有()
A.限制性内切酶B.DNA连接酶C.TaqDNA聚合酶D.碱性磷酸酶
3.用于核酸分离的方法有()
A.琼脂糖凝胶电泳B.聚丙烯酰胺凝胶电泳C.离子交换层析D.凝胶过滤层析
4.以下哪些技术可用于蛋白质的定性分析()
A.SDSB.WesternblotC.质谱分析D.等电聚焦电泳
5.基因表达调控的研究方法包括()
A.基因敲除B.RNA干扰C.基因芯片技术D.染色质免疫沉淀技术
三、判断题(总共10题,每题2分,请判断对错,对的打√,错的打×)
1.分子生物学实验中,所有操作都必须在无菌条件下进行。()
2.PCR反应中不需要引物也能扩增DNA。()
3.限制性内切酶切割后的DNA片段末端一定是平端。()
4.蛋白质的一级结构决定其高级结构。()
5.基因表达载体只能导入原核细胞。()
6.Westernblot可用于检测蛋白质的分子量和表达量。()
7.核酸分子杂交技术只能用于检测DNA。()
8.蛋白质纯化过程中,纯度越高越好。()
9.基因克隆就是将目的基因与载体连接。()
10.实时荧光定量PCR技术比普通PCR技术更准确。()
四、简答题(总共3题,每题15分)
1.请简述PCR技术的原理及操作步骤。
2.如何构建一个基因表达载体?请说明主要步骤和相关元件的作用。
简述蛋白质印迹法(Westernblot)的基本原理和操作流程。
五、实验设计题(总共1题,25分)
设计一个实验,从细胞中提取总RNA,并检测某一特定基因的表达水平。请详细说明实验步骤、所用试剂及仪器,以及如何分析实验结果。
答案:
一、选择题
1.D
2.C
3.B
4.B
5.A
6.C
7.A
8.D
9.D
10.D
二、多项选择题
1.AB
2.ABCD
3.AB
4.ABCD
5.ABCD
三、判断题
1.×
2.×
3.×
4.√
5.×
6.√
7.×
8.×
9.×
10.√
四、简答题
1.PCR技术原理:以拟扩增的DNA分子为模板,以一对分别与模板5末端和3末端相互补的寡核苷酸片段为引物,在DNA聚合酶的作用下,按照半保留复制的机制沿着模板链延伸直至完成新的DNA合成,重复这一过程,即可使目的DNA片段得到扩增。操作步骤:包括变性、退火、延伸三个步骤的循环。
2.构建
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