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第2讲微生物的培养与应用
酶的应用
-2-1.微生物的分离和培养。2.某种微生物数量的测定。3.培养基对微生物的选择作用。4.酶活力测定的一般原理和方法。5.酶在食品制造和洗涤等方面的应用。6.制备和应用固相化酶。
-3-核心梳理提能探究考向感悟归纳总结微生物的分离与培养1.培养基(1)概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。?(2)营养组成:一般都含有水、碳源、氮源和无机盐,还需要满足微生物生长对pH、氧气以及特殊营养物质的要求。?教材深挖平板冷凝后,为什么要将平板倒置?提示:平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面的湿度也比较高,将平板倒置,既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。
-4-核心梳理提能探究考向感悟归纳总结2.无菌技术(1)关键:防止外来杂菌的入侵。?(2)无菌操作的方法
-5-核心梳理提能探究考向感悟归纳总结3.大肠杆菌的纯化培养(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基(2)纯化大肠杆菌①纯化培养原理:在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞,使其长成单个的菌落,这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。?②菌落:由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体。?③常用的微生物接种方法a.平板划线法:通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。?b.稀释涂布平板法:将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。?
-6-核心梳理提能探究考向感悟归纳总结(3)菌种的保藏方法①对于频繁使用的菌种,可以采用临时保藏的方法。?②对于需要长期保存的菌种,可以采用甘油管藏的方法。?
-7-核心梳理提能探究考向感悟归纳总结(1)培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。(√)(2)在配制培养基时,除满足营养需求外,还应考虑微生物对pH、O2及特殊营养物质的需求。(√)(3)培养基分装到培养皿后才能进行灭菌。(×)(4)消毒的原则是既能杀死材料表面的微生物,又要减少消毒剂对细胞的伤害。(√)(5)无菌操作的对象只要是没有生物活性的材料(如培养基、接种环等)都可采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。(×)(6)平板划线法中每一次划线后要将接种环灼烧。(√)(7)用稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时,只要稀释度足够高,就能在培养基表面形成单个菌落。(√)
-8-核心梳理提能探究考向感悟归纳总结右上图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图,请思考下列问题。(1)获得图A效果和图B效果的接种方法分别是什么?提示:获得图A效果的接种方法为稀释涂布平板法,获得图B效果的接种方法为平板划线法。(2)某同学在纯化土壤中的某种细菌时,发现培养基上的菌落连成了一片,最可能的原因是什么?应当怎样操作才可避免此种现象?提示:最可能的原因是菌液浓度过高或划线时在每次划线后未将接种环灼烧灭菌;采取的措施是增大稀释倍数或每次划线后将接种环灼烧灭菌。
-9-核心梳理提能探究考向感悟归纳总结考向微生物的纯化技术(2019全国Ⅰ卷)已知一种有机物X(仅含有C、H两种元素)不易降解,会造成环境污染。某小组用三种培养基筛选土壤中能高效降解X的细菌(目标菌)。Ⅰ号培养基:在牛肉膏蛋白胨培养基中加入X(5g/L)。Ⅱ号培养基:氯化钠(5g/L),硝酸铵(3g/L),其他无机盐(适量),X(15g/L)。Ⅲ号培养基:氯化钠(5g/L),硝酸铵(3g/L),其他无机盐(适量),X(45g/L)。回答下列问题。
-10-核心梳理提能探究考向感悟归纳总结(1)在Ⅰ号培养基中,为微生物提供氮源的是。Ⅱ、Ⅲ号培养基中为微生物提供碳源的有机物是。?(2)若将土壤悬浮液接种在Ⅱ号液体培养基中,培养一段时间后,不能降解X的细菌比例会,其原因是?。?(3)Ⅱ号培养基加入琼脂后可以制成固体培养基,若要以该固体培养基培养目标菌并对菌落进行计数,接种时,应采用的方法是。?(4)假设从Ⅲ号培养基中得到了能高效降解X的细菌,且该菌能将X代谢为丙酮酸,则在有氧条件下,丙酮酸可为该菌的生长提供和。?
-11-核心梳理提能探究考向感悟归纳总结答案:(1)牛肉膏、蛋白胨X(2)下降不能降解X的细菌因缺乏碳源不能增殖,而能降解
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