2023届一轮复习浙科版基因工程的原理和技术96张课件.pptxVIP

;;;;;2.限制酶、DNA连接酶与载体;归纳总结;提醒(1)限制酶的选择方法;(2)标记基因的筛选原理

载体上的标记基因一般是某种抗生素的抗性基因，而受体细胞没有抵抗该抗生素的能力。将含有某抗生素抗性基因的载体导入受体细胞，抗性基因在受体细胞内表达，受体细胞对该抗生素产生抗性。在含有该抗生素的培养基上，能够生存的是被导入了载体的受体细胞(如下图所示)。;3.DNA的粗提取与鉴定

(1)实验原理;(2)方法步骤;冷酒精;项目;考向一基因工程的工具

1.图甲、乙中的箭头表示三种限制性内切核酸酶的酶切位点，ampr表示氨苄青霉素抗性基因，neor表示新霉素抗性基因。若想将图乙所示目的基因导入图甲所示质粒中，下列叙述正确的是;A.图甲中的质粒用BamHⅠ切割后，含有4个游离的磷酸基团

B.在构建重组质粒时，可用PstⅠ和BamH切割质粒和外源DNA

C.用PstⅠ和HindⅢ酶切，加入DNA连接酶后可得到1种符合要求的重

组质粒

D.导入目的基因的大肠杆菌可在含氨苄青霉素的培养基中生长;;2.据图所示，下列有关酶功能的叙述，不正确的是

A.限制性内切核酸酶可以切断a处

B.DNA聚合酶可以连接a处

C.解旋酶可以使b处解开

D.DNA连接酶可以连接c处;;归纳总结;考向二DNA的粗提取与鉴定

3.(2022·湖州期中)不同储藏条件对棉叶DNA纯度及提取率(提取率越高，获得的DNA越多)的影响，结果如图所示。下列有关叙述正确的是;A.利用乙二胺四乙酸二钠(EDTA)处理棉叶，能使核蛋白变性并与DNA分离

B.新鲜棉叶的DNA纯度最高，提取DNA的量也最多

C.冷冻保存3d组的DNA提取效果优于冷鲜保存3d

D.用二苯胺试剂鉴定，蓝色最浅的是冷冻3d处理后提取的DNA;;选项;;;1.基因的结构;2.基因工程的基本操作程序;PCR和核酸分子杂交;(1)目的基因：用于改变受体细胞性状或获得预期表达产物等的基因，主要是指编码蛋白质的基因。

(2)获取目的基因的方法;方法;文库类型;不同组织细胞和同一组织细胞在不同的发育阶段，cDNA文库是___

(填“会”或“不会”)有差异的，原因是。;(4)通过PCR技术体外扩增目的基因

①原理：模仿体内。;③过程;①与体内DNA复制相比，PCR技术所用TaqDNA聚合酶特点是。

②PCR扩增DNA片段大小由决定。

③在第轮循环产物中开始出现目标DNA片段(两条核苷酸链等长的DNA分子)。;3.活动：PCR扩增DNA片段及凝胶电泳鉴定

(1)实验原理

①PCR经过多次循环、、三个步骤，可获得大量目的基因或DNA片段。

②PCR技术扩增酵母细胞中编码核糖体RNA的DNA部分片段，长度为841bp，通过进行鉴定。

③使用对凝胶进行染色，再用以及脱色，观察并分析琼脂糖凝胶中DNA条带。;(2)方法步骤

①PCR扩增;②琼脂糖凝胶电泳;亚甲基蓝;考向一基因工程的工具

1.下列关于基因工程的叙述正确的是

A.同种限制性内切核酸酶切出的黏性末端一定相同，不同种限制性内切

核酸酶切出的黏性末端一定不同

B.DNA连接酶能催化任意2个DNA片段之间形成磷酸二酯键

C.通常根据标记基因的产物特征进行筛选含目的基因的受体细胞，根据

目的基因的产物特征判断基因工程是否取得成功

D.质粒、限制性内切核酸酶、DNA连接酶的化学本质都是DNA;;2.(2016·全国Ⅰ,40)某一质粒载体如图所示，外源DNA插入到ampr或tetr中会导致相应的基因失活(ampr表示氨苄青霉素抗性基因，tetr表示四环素抗性基因)。有人将此质粒载体用BamHⅠ酶切后，与用BamHⅠ酶切获得的目的基因混合，加入DNA连接酶进行连接反应，用得到的混合物直接转化大肠杆菌。结果大肠杆菌有的未被转化，有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种，分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。请回答下列问题：;;(2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选，在上述四种大肠杆菌细胞中，未被转化的和仅含环状目的基因的细胞是不能区分的，其原因是_______________________________________________________；

并且________________和_______