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林木原生质体分离试题库及答案

一、单项选择题（每题2分，共20分）

1.分离林木原生质体常用的酶是（）

A.淀粉酶B.纤维素酶C.蛋白酶D.脂肪酶

2.一般用于分离原生质体的细胞应处于（）

A.衰老期B.休眠期C.对数生长期D.分化期

3.下列哪种渗透压调节剂较常用（）

A.蔗糖B.葡萄糖C.甘露醇D.麦芽糖

4.原生质体分离时，酶液的pH一般调节在（）

A.4.0-5.0B.5.5-6.5C.7.0-8.0D.8.5-9.5

5.分离原生质体的材料通常选用（）

A.成熟叶片B.幼嫩组织C.木质化茎D.老根

6.原生质体纯化常采用的方法是（）

A.过滤法B.离心法C.沉淀法D.漂浮法

7.酶解分离原生质体时，温度一般控制在（）

A.10-15℃B.15-20℃C.25-30℃D.35-40℃

8.下列对原生质体描述正确的是（）

A.无细胞壁B.无细胞膜C.无细胞核D.无细胞器

9.分离原生质体时，离心速度一般为（）

A.100-200rpmB.500-1000rpmC.1500-2000rpmD.2500-3000rpm

10.用于林木原生质体分离的酶溶液需要进行（）处理。

A.过滤灭菌B.高温灭菌C.紫外线灭菌D.化学消毒

二、多项选择题（每题2分，共20分）

1.影响林木原生质体分离的因素有（）

A.材料基因型B.酶的种类C.酶解时间D.渗透压调节剂

2.以下可作为分离原生质体的材料有（）

A.叶片B.愈伤组织C.悬浮细胞D.茎段

3.常用的分离原生质体的酶包括（）

A.纤维素酶B.果胶酶C.半纤维素酶D.淀粉酶

4.原生质体纯化的方法有（）

A.离心沉淀法B.漂浮法C.界面法D.过滤法

5.酶解过程中，需要注意的条件有（）

A.温度B.pH值C.酶浓度D.振荡速度

6.制备原生质体时，对分离材料预处理的方法有（）

A.低温处理B.黑暗处理C.预培养D.化学药剂处理

7.原生质体活力检测的方法有（）

A.荧光素双醋酸酯（FDA）染色法B.伊凡蓝染色法C.氯化三苯基四氮唑（TTC）还原法D.中性红染色法

8.以下关于原生质体的说法正确的是（）

A.具有全能性B.可进行细胞融合C.无细胞壁限制D.与完整细胞生理特性相同

9.分离原生质体时，酶液中常添加的物质有（）

A.氯化钙B.磷酸二氢钾C.牛血清白蛋白D.抗生素

10.用于林木原生质体分离的实验器材有（）

A.离心机B.显微镜C.移液器D.培养箱

三、判断题（每题2分，共20分）

1.任何林木组织都能轻易分离出原生质体。（）

2.酶解时间越长，原生质体分离效果越好。（）

3.渗透压调节剂对原生质体的稳定性有重要作用。（）

4.分离原生质体不需要严格的无菌操作。（）

5.悬浮细胞比叶片更适合分离原生质体。（）

6.原生质体在低渗溶液中会吸水涨破。（）

7.不同基因型的林木材料，原生质体分离难度相同。（）

8.酶解过程中不需要进行振荡。（）

9.原生质体活力检测只能用一种方法。（）

10.离心速度越快，对原生质体损伤越小。（）

四、简答题（每题5分，共20分）

1.简述选择分离原生质体材料的原则。

答：应选生长旺盛、生命力强的组织，如幼嫩叶片、悬浮细胞或处于对数生长期的愈伤组织。材料要易于酶解分离，且遗传稳定性好，能保持良好的再生能力。

2.原生质体纯化的目的是什么？

答：去除酶解液中的杂质，如未酶解的细胞碎片、残余酶蛋白等，获得纯净的原生质体，提高原生质体的活力和后续培养效果，利于开展相关实验研究。

3.简述影响原生质体活力的因素。

答：材料本身状态，如生理年龄、基因型；酶解条件，包括酶的种类、浓度、酶解时间、温度、pH等；分离过程中的操作，如离心速度、纯化方法等；保存和培养条件也会影响活力。

4.简要说明原生质体分离的基本步骤。

答：首先选择合适材料并预处理，然后配制酶液，将材料放入酶液中酶解，之后对酶解产物进行纯化，去除杂质获得纯净原生质体，最后检测原生质体的活力。

五、讨论题（每题5分，共