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林木原生质体融合体细胞选择试题库及答案

一、单项选择题（每题2分，共20分）

1.原生质体分离常用的酶是（）

A.淀粉酶B.纤维素酶C.蛋白酶D.脂肪酶

2.以下哪种方法常用于原生质体活力检测（）

A.酚藏花红染色B.中性红染色C.伊文思蓝染色D.台盼蓝染色

3.原生质体融合时常用的融合剂是（）

A.PEGB.NaClC.KClD.蔗糖

4.体细胞杂种筛选时，利用双亲对某种抗生素抗性差异进行筛选是（）

A.遗传互补筛选B.抗性互补筛选C.生长特性筛选D.形态筛选

5.原生质体培养时，常用的渗透压调节剂是（）

A.葡萄糖B.甘露醇C.麦芽糖D.淀粉

6.以下属于物理融合法的是（）

A.电融合B.化学融合C.PEG融合D.高Ca2?-高pH融合

7.原生质体分离中，酶解时间过长会导致（）

A.原生质体产量增加B.原生质体活力下降C.杂质减少D.细胞壁再生加快

8.体细胞杂种鉴定中，通过观察染色体数目和形态进行的鉴定是（）

A.细胞学鉴定B.生化鉴定C.分子鉴定D.形态鉴定

9.原生质体融合后形成的异核体（）

A.含有两个不同来源的细胞核B.含有一个细胞核C.不含细胞核D.细胞核发生融合

10.用于原生质体培养的培养基是（）

A.MS培养基B.B5培养基C.KM8P培养基D.White培养基

二、多项选择题（每题2分，共20分）

1.原生质体分离的材料可以是（）

A.叶片B.愈伤组织C.悬浮细胞D.茎段

2.影响原生质体活力的因素有（）

A.酶的种类和浓度B.分离时间C.渗透压D.温度

3.原生质体融合的方式有（）

A.自发融合B.化学融合C.物理融合D.生物融合

4.体细胞杂种筛选方法包括（）

A.机械分离法B.遗传互补筛选C.利用生长差异筛选D.利用标记基因筛选

5.原生质体培养过程中需要添加的物质有（）

A.植物激素B.碳源C.氮源D.维生素

6.用于原生质体活力检测的方法有（）

A.荧光素双醋酸酯（FDA）染色B.氯化三苯基四氮唑（TTC）还原法C.伊文思蓝染色D.中性红染色

7.体细胞杂种鉴定方法有（）

A.形态学鉴定B.细胞学鉴定C.生化鉴定D.分子生物学鉴定

8.原生质体融合技术的应用包括（）

A.克服远缘杂交不亲和B.创造新的种质资源C.培育新品种D.基因转移

9.原生质体融合前，对原生质体进行预处理的方法有（）

A.物理预处理B.化学预处理C.生物预处理D.不处理

10.以下哪些是原生质体培养的步骤（）

A.原生质体分离B.原生质体纯化C.原生质体培养D.细胞壁再生及植株再生

三、判断题（每题2分，共20分）

1.所有植物细胞都能分离出原生质体。（）

2.原生质体融合只能在亲缘关系较近的物种间进行。（）

3.高Ca2?-高pH融合法属于物理融合法。（）

4.体细胞杂种一定能表现出双亲的优良性状。（）

5.原生质体培养时，渗透压越高越好。（）

6.荧光素双醋酸酯（FDA）染色能检测原生质体活力，有活力的原生质体呈绿色荧光。（）

7.利用双亲对除草剂抗性差异可进行体细胞杂种筛选。（）

8.原生质体融合后，只能形成异核体。（）

9.原生质体培养过程中，不需要光照。（）

10.体细胞杂种鉴定只能用分子生物学方法。（）

四、简答题（每题5分，共20分）

1.简述原生质体分离的一般步骤。

答：选取合适材料（叶片、愈伤组织等），消毒后切成小块，放入含酶液（纤维素酶等）的溶液中，在适宜温度、摇床上酶解，酶解结束后过滤、离心，去除杂质和未酶解细胞，获得纯化原生质体。

2.简述体细胞杂种筛选的意义。

答：能从大量融合细胞中分离出真正的体细胞杂种，排除未融合细胞、同核体等干扰，有利于后续培育出具有双亲优良性状的新品种，提高育种效率，创造新种质资源。

3.原生质体培养过程中，影响细胞壁再生的因素有哪些？

答：主要有培养条件如温度、光照、渗透压，培养基成分（植物激素、营养物质等），以及原生质体本身的来源和活力等因素。适宜条件利于细胞壁再生。

4.简述化学融合法的原理。

答：常用PEG等化