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流感病毒标本采集、运输、分离检测及注意事项PPT

汇报人：XXXX

2月15日;

02标本采集规范

04标本包装与运输;

05

CONTENTS

目录

07;

01

引言与背景;

疫情防控的关键环节

及时、准确检测流感病毒是疫情防控的重要举措，有助于早期发现病例、实施隔离措施，减少院内感染和社区传播风险。

流行病学研究的基础

通过对流感病毒标本的采集、分离和检测，可掌握病毒的遗传特点、地域分布及变异情况，为疫苗研发、防控策略制定提供科学数据支持。;

杂质与抑制剂的干扰及消除

痰液等样本需经蛋白酶K(2mg/mL)或专用消化液预处理，

55℃震荡消化30-60分钟以去除黏液等杂质。避免血红蛋白、唾液等PCR抑制剂影响，可通过稀释复测或优化提取方法消除干扰。;

提升疫情防控效率

标准化流程有助于快速、高效地完成标本从采集到检测的全过程，为流感疫情的早发现、早诊断、早治疗和及时防控提供有力支持。;

02

标本采集规范;

采样时机选择原则

疑似病例应在出现症状后48小时内采集样本，此时病毒载量最高，可获取最佳检测效果；重症患者尽可能在发病初期采集，持续发热或症状加重者建议每3-5天采集一次，连续采集3-5次。;

采样时机与对象选择

最佳采样时间窗核心采样对象界定动态采样频率要求特殊人群采样策略;

样本处理与标记

迅速将拭子放入含病毒保存液的试管中，折断多余手柄，旋紧管盖。在试管上清晰标记患者姓名、样本类型、采集时间等信息，立即低温保存。;

咽拭子采集操作规范

患者张口发啊音，用压舌板轻压舌根，避免触碰舌面或牙齿。使用聚酯纤维拭子轻柔擦拭双侧扁桃体隐窝及咽后壁黏膜，旋转并停留数秒后取出，立即放入含病毒保存液的采样管中。

特殊人群采样注意事项;

婴幼儿与新生儿

选择细软拭子，优先鼻咽采样以减少刺激，需两名操作者配合固定体位，避免拭子误入气道。

免疫抑制患者

严格无菌操作，采样前后加强手卫生，避免引发继发感染，样本需单独标记并优先检测。;

03

标本保存与预处理;

抗生素添加标准

需添加庆大霉素(终浓度

0.1mg/ml)和抗真菌药物

(终浓度2mg/ml),抑制细菌和真菌污染，添加后需重新调整pH至7.4。

配制与分装要求

配制好的保存液应分装为3-4ml/管，121℃高压灭菌20分钟，-20℃冻存备用，避免反复冻融影响效能。;

短期保存温度规范

标本采集后若48小时内送检，应置于2-8℃冷藏环境，使用带温度监控的冷藏箱，避免温度波动超过±1℃。

特殊标本储存处理;

分装容器选择标准;

样本预处理操作规范

呼吸道标本需在生物安全柜内进行预

处理，痰液标本应加入等体积蛋白酶K

缓冲液(终浓度2mg/mL),55℃震荡

消化30-60分钟至完全液化；鼻咽/咽

拭子样本需充分混匀后低速离心

(800-1000rpm,5分钟),取上清液

用于后续检测。;

04

标本包装与运输;

主容器技术规范

采用带螺旋盖的耐低温塑料管，直接盛装标本，需确保密封防泄漏。液体标本量超过10mL时应使用双层主容器，管身用油性记号笔标注编号、种类、姓名及采样日期。

外包装合规标准

使用符合UN2814标准的硬质瓦楞纸箱或塑料箱，

表面清晰标注生物危害标识(红色三叶型标志)、感染性物质标签、收发货信息及应急联系人。

需通过1.2米跌落试验验证无泄漏。;

温度控制与监测要求

样本需在2-8℃条件下48小时内运送，超过48小时应-70℃以下保存。运输全程使用冷链箱配备温度记录仪，数据需可追溯72小时以上，确保温度波动不超过±1℃。;

异常温度应急响应机制

当温度超出阈值时，设备立即触发声光报警并推送短信至责任人手机，需在30分钟内排查故障(如补充冰排或更换冷链箱),同时记录应急处置全过程。;

文件填写规范

送检单中患者职业参照传染病汇报卡选项填写，标本种类按规定代码标注(如A鼻咽拭子、B鼻咽吸取物等),标本量需注明，填表人员及送样时间需清晰记录并加盖单位公章。;

05

病毒分离与检测技术;

逆转录与扩增体系配置

将提取的RNA通过逆转录酶转化为cDNA,随后加入流感病毒特异性引物(终浓度400nM)和

TaqMan探针(终浓度200nM),配置包含预混反应缓冲液、逆转录/聚合酶混合液的Real-time

RT-PCR反应体系。;

Virusdetection

Technique

Viralcells;