专题03 基因工程 高二生物下学期期中考点（苏教版2019）.pptxVIP

选必三基因工程章末复习一、重组DNA技术的基本工具二、基因工程的基本操作程序三、DNA的粗提取与鉴定四、基因工程的应用五、蛋白质工程

课标要求1.阐明DNA重组技术的实现需要利用限制性内切核酸酶、DNA连接酶和载体三种基本工具2.阐明基因工程的基本操作程序主要包括目的基因的获取、基因表达载体的构建、目的基因导入受体细胞和目的基因及其表达产物的检测、鉴定等步骤3.概述人们根据基因工程原理，进行蛋白质设计和改造，可以获得性状和功能更符合人类需求的蛋白质4.举例说明基因工程在农牧、食品及医药等行业的广泛应用而改善了人类的生活品质

课标要求5.举例说出日常生活中的转基因产品，探讨转基因技术在应用过程中带来的影响6.举例说出生殖性克隆人面临的伦理问题，分析说明我国为什么不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验7.举例说明历史上生物武器对人类造成了严重的威胁与伤害，认同我国反对生物武器及其技术和设备的扩散?

一、重组DNA技术的基本工具1.基因工程(重组DNA技术)概述基因分子水平基因重组赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物制品定向改造生物性状；克服远缘杂交不亲和障碍原理：操作对象：操作水平：结果：意义：转基因等技术操作技术：

DNA重组技术的基本工具(三种“分子工具”)工具酶准确切割DNA分子的”分子手术刀”将DNA片段再连接起来的”分子缝合针”将体外重组好的DNA分子导入受体细胞的”分子运输车”载体限制酶DNA连接酶剪切拼接导入表达一、重组DNA技术的基本工具2.重组DNA技术的基本工具

(1)限制性内切核酸酶(也称“限制酶”)2.重组DNA技术的基本工具黏性末端GCAATTTATACG5335GCTTAAAATTCG平末端CGCCGGGCGCGC一、重组DNA技术的基本工具来源：特点(专一性)：结果：主要是从原核生物中分离纯化来的断开核苷酸之间的磷酸二酯键。②产生平末端①产生黏性末端作用：识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开。

源于选择性必修3P71“旁栏思考”:原核生物中存在限制酶的意义是什么？原核生物中限制酶的作用是切割外源DNA以保证自身安全，防止外来病原物的危害。源于选择性必修3P74“拓展应用”:限制酶来源于原核生物，为什么不能切割自己的DNA分子？限制酶不切割自身DNA的原因是原核生物DNA分子中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。(1)限制性内切核酸酶(也称“限制酶”)2.重组DNA技术的基本工具一、重组DNA技术的基本工具

(2)DNA连接酶作用：类型：将两个DNA片段连接起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。E.coliDNA连接酶T4DNA连接酶只连接黏性末端缝合黏性末端和平末端（效率较低）来源：大肠杆菌作用：来源：作用：T4噬菌体一、重组DNA技术的基本工具2.重组DNA技术的基本工具DNA连接酶与DNA聚合酶是一样吗？

AATTGCAATTAATTDNA聚合酶DNA聚合酶DNA聚合酶DNA聚合酶DNA聚合酶DNA聚合酶的作用(2)DNA连接酶一、重组DNA技术的基本工具2.重组DNA技术的基本工具

DNA连接酶DNA聚合酶相同作用实质化学本质不同点模板作用对象作用结果用途都能催化形成磷酸二酯键都是蛋白质 不需要需要DNA的一条链作模板形成完整的重组DNA分子形成DNA的一条链基因工程DNA复制在两个DNA片段间形成磷酸二酯键将单个核苷酸连接到已有DNA片段，形成磷酸二酯键DNA连接酶和DNA聚合酶

（3）基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”质粒(常用）、噬菌体、动植物病毒种类：作用：①将目的基因送入受体细胞②在受体细胞内对目的基因进行大量复制载体需具备的条件——供外源DNA片段（目的基因）插入其中?真正被用作载体的质粒，都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的。①有一个至多个限制酶切割位点③具有标记基因④对受体细胞无害、易分离——便于重组DNA分子的筛选②能在细胞中进行自我复制，或整合到受体DNA上，随受体DNA同步复制。——避免受体细胞受到损伤一、重组DNA技术的基本工具2.重组DNA技术的基本工具

拟核质粒大肠杆菌氨苄青霉素抗性基因目的基因复制起点质粒①来源：来源于许多等生物，它是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的很小的（化学本质），故质粒有个游离的磷酸基团。②氨苄青霉素抗性基因在质粒DNA上称为，其作用是。③复制原点：。细菌和酵母菌